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當(dāng)前位置:上海研生實(shí)業(yè)有限公司>>天然蛋白、重組蛋白>>重組蛋白/RP>> 睪丸特異性激酶2(TESK2)重組蛋白
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所 在 地上海市
更新時(shí)間:2023-03-22 20:59:39瀏覽次數(shù):287次
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主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant Testis Specific Kinase 2 (TESK2) |
種屬 | Mus musculus (Mouse,小鼠) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
公司產(chǎn)品僅供科研使用,,不得用于臨床,!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 物種 |
睪丸特異性激酶2(TESK2)重組蛋白 | Recombinant Testis Specific Kinase 2 (TESK2) | Mus musculus (Mouse,小鼠) |
商品介紹:
Testicular protein kinase 2; Dual specificity testis-specific protein kinase 2 酶與激酶 物種:Mus musculus (Mouse,,小鼠) 來源:原核表達(dá) 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定) 亞細(xì)胞定位::細(xì)胞核 預(yù)測分子量:32.8kDa 實(shí)際分子量:33kDa(差異分析請參閱說明書) 片段與標(biāo)簽:Asp58~Met313 with N-terminal His Tag 緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.) 性狀:凍干粉 純度:> 95% 等電點(diǎn):5.7 應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,,通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白,。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,,離子交換,,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。
5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性,。
相關(guān)產(chǎn)品:
烯醇化酶(ENO3)重組蛋白Recombinant Enolase 1 (ENO1)
胃脂酶(LIPF)重組蛋白Recombinant Azurocidin (AZU)
外生骨疣蛋白2(EXT2)重組蛋白Recombinant Endoplasmic Reticulum Resident Protein 57 (ERp57)
外生骨疣蛋白1(EXT1)重組蛋白Recombinant Protein Disulfide Isomerase (PDI)
注意事項(xiàng):
1、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時(shí)間有所不同,,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時(shí)間,。
2、雖然作用溫和,,但能硬化組織,,固定時(shí)間過久會導(dǎo)致組織變脆,切片時(shí)易碎,。因此固定時(shí)間通常不宜超過 24 小時(shí),。
3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙,。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,,可造成假陰性的染色,,影響免疫組化結(jié)果,。因此,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測時(shí),,有時(shí)需要對抗原先進(jìn)行修復(fù),,然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。
4,、本產(chǎn)品對人體有害,,操作時(shí)請小心,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi),。
5,、為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用,。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,,離心10000轉(zhuǎn)/分,,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,,即為全蛋白提取物,,蛋白定量(Bradford法、BCA法),;
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中,, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑,, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,,溫和振蕩15 min,;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法,、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。
Cystatin-C產(chǎn)品名稱: 胱抑suC/半胱氨suan蛋白mei劑C抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat
phospho-TYRO3 (Tyr681)產(chǎn)品名稱: 受體酪氨suan激mei抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
C12ORF49產(chǎn)品名稱: 12號染色體開放閱讀框49抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Zebrafish
APBA1產(chǎn)品名稱: β淀粉樣前體蛋白結(jié)合蛋白1抗體(X11α)交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Sheep
ATXN7L1產(chǎn)品名稱: 蛋白7樣1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Horse, Sheep
SIAH2產(chǎn)品名稱: 泛su連接meiSiah2交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
PAPOL A+B+G產(chǎn)品名稱: 多聚合meiα/β/γ抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow
AKAP14產(chǎn)品名稱: A激mei錨定蛋白14抗體交叉反應(yīng): Mouse, Rat
FAM62C產(chǎn)品名稱: 延伸突觸蛋白3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Sheep
Unc5a產(chǎn)品名稱: 神經(jīng)突起生長誘導(dǎo)因子受體Unc5a抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep
睪丸特異性激酶2(TESK2)重組蛋白人ADP核糖轉(zhuǎn)移mei3(ART3)ELISA試劑盒ART3ADP核糖轉(zhuǎn)移mei3elisa檢測試劑盒Human ADP Ribosyltransferase 3(ART3)ELISA Kit
人Abl交互子3(ABI3)ELISA試劑盒ABI3Abl交互子3elisa kitHuman Abl Interactor 3(ABI3)ELISA Kit
人Abl交互子2(ABI2)ELISA試劑盒ABI2Abl交互子2ELISA試劑盒Human Abl Interactor 2(ABI2)ELISA Kit
人Abl交互子1(ABI1)ELISA試劑盒ABI1Abl交互子1elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Abl Interactor 1(ABI1)ELISA Kit
人ⅫB組磷脂meiA2(PLA2G12B)ELISA試劑盒PLA2G12BⅫB組磷脂meiA2elisa檢測試劑盒Human Phospholipase A2, Group XIIB(PLA2G12B)ELISA Kit
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