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當前位置:上海研生實業(yè)有限公司>>天然蛋白,、重組蛋白>>重組蛋白/RP>> 整合素連鎖激酶(ILK)重組蛋白
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所 在 地上海市
更新時間:2023-03-22 14:27:40瀏覽次數(shù):365次
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主要用途 | 僅供科研實驗 | 英文名稱 | Recombinant Integrin Linked Kinase (ILK) |
種屬 | Homo sapiens (Human,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
公司產(chǎn)品僅供科研實驗產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:整合素連鎖激酶(ILK)重組蛋白
物種:Homo sapiens (Human,,人)
英文名稱:Recombinant Integrin Linked Kinase (ILK)
ILK1; P59; 59 kDa serine/threonine-protein kinase
信號轉(zhuǎn)導
酶與激酶
腫瘤免疫
感染免疫
物種:Homo sapiens (Human,,人) 來源:原核表達 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定) 亞細胞定位::細胞膜, 細胞質(zhì) 預測分子量:34.5kDa 實際分子量:35kDa(差異分析請參閱說明書) 片段與標簽:Asn183~Lys452 with N-terminal His Tag 緩沖液成份:100mM NaHCO3, 500mM NaCl緩沖液(pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300) 性狀:凍干粉 純度:> 95% 等電點:8.8 應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
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標簽選擇:
親和標簽:蛋白重組表達過程中采用親和標簽融合表達有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易,;另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶。蛋白標簽可分兩類:一類是短肽類標簽,;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達,。使用不同的蛋白標簽需要根據(jù)具體案例來分析。
不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,,大致步驟如下:
真核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:
a. 選擇表達載體和宿主細胞(常用的CHO和HEK293)
b. 表達載體的構(gòu)建
c. 無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提
d. 細胞瞬時轉(zhuǎn)染
e. 表達小試,,條件優(yōu)化
f. 表達分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)
g. 大量表達
h. 親和純化
i. 檢測和鑒定
原核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:
a. 選擇表達載體
b. 密碼子優(yōu)化
c. 基因合成/亞克隆
d. 轉(zhuǎn)化表達菌株
e. 蛋白表達小試分析
f. 如果蛋白可溶,蛋白親和純化
g. 如果蛋白不可溶,,則需要變復性來制備可溶蛋白,。
h. 鑒定,包括SDS-PAGE和WB鑒定
GZMH蛋白,;表達蛋白的分析,、純化、檢測
誘導表達成功后,,表達蛋白的分析,、純化、檢測應該順當,,按一般的實驗步驟做沒太大的問題,。
操作步驟 :
根據(jù)使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM,。混勻備用(PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加),。
1,、樣品前處理:
a)對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS,、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍,。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,,使裂解液和細胞充分接觸,。
b)對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照6孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,,再用手指輕彈以充分裂解細胞,。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,,必需分裝成 50-100 萬細胞/管,,然后再裂解。
c)對于組織樣品: 把切成細小的碎片,。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,,可以適當減少裂解液的用量),。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解,。
2,、后處理:
將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,,即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定,、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作
特點:
標記:標記反應簡單,、溫和且很少抑制抗體活性,,將與抗體共價結(jié)合是一種非常簡便、直接的標記方法,。
酶標記:酶標記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當方法連接而成,,其應用范圍非常廣泛,結(jié)果即時可見,、敏感性高,。
熒光標記:熒光基團AbFluorTM是新型的熒光標記物之一,產(chǎn)品覆蓋350-770nm,。不同的AbFluor基團經(jīng)恰當?shù)募す饪砂l(fā)光,, 從而得知抗體的定位和待測抗原的分布情況,主要用于細胞分選或高分辨率免疫染色,,是一種非常好的亞細胞水平定位的方法,。
SPTBN2產(chǎn)品名稱: 非紅細胞影腦蛋白β2/spectrin β III抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Rabbit, Sheep
PYCR1產(chǎn)品名稱: P5C還原mei1抗體交叉反應: Human
MPP8/MPHOSPH8產(chǎn)品名稱: M期磷蛋白8抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
human CD8/AF555產(chǎn)品名稱: AF555標記小鼠抗人CD8單克隆抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian
HMGB1產(chǎn)品名稱: 高遷移率族蛋白B1抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse
Plexin A4產(chǎn)品名稱: 神經(jīng)叢蛋白A4抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Horse, Sheep
phospho-HDAC7 (Ser358)產(chǎn)品名稱: 組蛋白去乙酰化mei7抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat
ZRANB2/ZNF265產(chǎn)品名稱: 鋅指蛋白265抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Cow, Horse, Sheep
PKC alpha產(chǎn)品名稱: 蛋白激meiC α抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Rabbit
整合素連鎖激酶(ILK)重組蛋白人泛su蛋白連接meiE3成分N-識別蛋白4(UBR4)ELISA試劑盒UBR4泛su蛋白連接meiE3成分N-識別蛋白4elisa kitHuman Ubiquitin Protein Ligase E3 Component N-Recognin 4(UBR4)ELISA Kit
人泛suD(UBD)ELISA試劑盒UBD泛suDELISA試劑盒Human Ubiquitin D(UBD)ELISA Kit
人泛suC(UBC)ELISA試劑盒UBC泛suCelisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Ubiquitin C(UBC)ELISA Kit
人泛醌蛋白4(UBQLN4)ELISA試劑盒UBQLN4泛醌蛋白4elisa檢測試劑盒Human Ubiquilin 4(UBQLN4)ELISA Kit
人泛醌蛋白3(UBQLN3)ELISA試劑盒UBQLN3泛醌蛋白3elisa kitHuman Ubiquilin 3(UBQLN3)ELISA Kit
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