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當(dāng)前位置:上海研生實(shí)業(yè)有限公司>>天然蛋白,、重組蛋白>>重組蛋白/RP>> 脂肪酸合酶(FASN)重組蛋白
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產(chǎn)品型號
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所 在 地上海市
更新時間:2023-03-21 20:50:40瀏覽次數(shù):264次
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主要用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant Fatty Acid Synthase (FASN) |
物種 | Homo sapiens (Human,,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
公司產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:脂肪酸合酶(FASN)重組蛋白
物種:Homo sapiens (Human,,人)
英文名稱:Recombinant Fatty Acid Synthase (FASN)
FAS; OA519; SDR27X1; Short Chain Dehydrogenase/Reductase Family 27X,Member 1; S-acetyltransferase; 3-oxoacyl synthase; Oleoyl hydrolase; Enoyl-acyl-carrier-protein reductase
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,,人) 來源:原核表達(dá) 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定) 亞細(xì)胞定位::細(xì)胞質(zhì) 預(yù)測分子量:38.3kDa 實(shí)際分子量:38kDa(差異分析請參閱說明書) 片段與標(biāo)簽:Leu26~Gln78 with N-terminal His and GST Tag 緩沖液成份:PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose. 性狀:凍干粉 純度:> 90% 等電點(diǎn):9.4 應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
相關(guān)產(chǎn)品:
Recombinant Human TELO2宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Human SALL4宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
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Recombinant Human TNFSF14宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
標(biāo)簽選擇:
親和標(biāo)簽:蛋白重組表達(dá)過程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易,;另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶。蛋白標(biāo)簽可分兩類:一類是短肽類標(biāo)簽,;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達(dá),。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來分析。
不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,,大致步驟如下:
真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:
a. 選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞(常用的CHO和HEK293)
b. 表達(dá)載體的構(gòu)建
c. 無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提
d. 細(xì)胞瞬時轉(zhuǎn)染
e. 表達(dá)小試,,條件優(yōu)化
f. 表達(dá)分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)
g. 大量表達(dá)
h. 親和純化
i. 檢測和鑒定
原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:
a. 選擇表達(dá)載體
b. 密碼子優(yōu)化
c. 基因合成/亞克隆
d. 轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株
e. 蛋白表達(dá)小試分析
f. 如果蛋白可溶,蛋白親和純化
g. 如果蛋白不可溶,,則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白,。
h. 鑒定,包括SDS-PAGE和WB鑒定
GZMH蛋白,;表達(dá)蛋白的分析,、純化、檢測
誘導(dǎo)表達(dá)成功后,,表達(dá)蛋白的分析,、純化、檢測應(yīng)該順當(dāng),,按一般的實(shí)驗(yàn)步驟做沒太大的問題,。
操作步驟 :
根據(jù)使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM,?;靹騻溆茫≒MSF 現(xiàn)用現(xiàn)加)。
1,、樣品前處理:
a)對于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍,。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸,。
b)對于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,,再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞,。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,,必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管,,然后再裂解。
c)對于組織樣品: 把切成細(xì)小的碎片,。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,,如果需要高濃度的蛋白樣品,,可以適當(dāng)減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,,直至充分裂解,。
2、后處理:
將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,,取上清,,即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測定、SDS-PAGE,、Western blotting 和免疫沉淀等操作
特點(diǎn):
標(biāo)記:標(biāo)記反應(yīng)簡單,、溫和且很少抑制抗體活性,將與抗體共價結(jié)合是一種非常簡便,、直接的標(biāo)記方法,。
酶標(biāo)記:酶標(biāo)記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成,其應(yīng)用范圍非常廣泛,,結(jié)果即時可見,、敏感性高。
熒光標(biāo)記:熒光基團(tuán)AbFluorTM是新型的熒光標(biāo)記物之一,產(chǎn)品覆蓋350-770nm,。不同的AbFluor基團(tuán)經(jīng)恰當(dāng)?shù)募す饪砂l(fā)光,, 從而得知抗體的定位和待測抗原的分布情況,主要用于細(xì)胞分選或高分辨率免疫染色,,是一種非常好的亞細(xì)胞水平定位的方法,。
5HT2C Receptor產(chǎn)品名稱: 5-羥色胺受體2C抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse
Endothelin B Receptor產(chǎn)品名稱: 內(nèi)皮suB受體抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
MMP-2產(chǎn)品名稱: 基質(zhì)金屬蛋白mei2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Rabbit, Sheep
CACNA1G + CACNA1H產(chǎn)品名稱: 電壓依賴性鈣通道CACNA1G+CACNA1H抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow
NSUN6產(chǎn)品名稱: NSUN6蛋白抗體交叉反應(yīng): Human
Beta arrestin 2產(chǎn)品名稱: β-蛋白2抗體/β休止蛋白2/β-arrestin抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, GuineaPig
應(yīng)用類型: Phosphorylated英文名稱: GAPDH (Loading Control)英文別名: 38 kDa BFA-dependent ADP-ribosylation substrate; Aging-associated gene 9 protein; BARS-38; cb609; EC 1.2.1.12; Calretinin產(chǎn)品名稱: 鈣結(jié)合蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse
Phospho-mTOR (Thr2446)產(chǎn)品名稱: 雷帕霉su靶蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
Caspase-6 subunit p18產(chǎn)品名稱: 半胱胺suan蛋白mei蛋白-6抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Rabbit
脂肪酸合酶(FASN)重組蛋白人P38蛋白激mei(P38MAPK)ELISA試劑盒P38MAPKP38蛋白激meielisa kitHuman P38 MAPK ELISA Kit
人P2蛋白抗體(IgG)ELISA試劑盒IgGP2蛋白抗體ELISA試劑盒Human myelin protein two antibody IgG ELISA Kit
人OX40配體(OX40L)ELISA試劑盒OX40LOX40配體elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human OX40L ELISA Kit
人OJ抗體/抗異亮氨酰tRNA合成mei抗體(OJ/IleRS)ELISA試劑盒OJ/IleRSOJ抗體/抗異亮氨酰tRNA合成mei抗體elisa檢測試劑盒Human anti-OJ-antibody,OJ/IleRS ELISA Kit
人N-甲基-D-天冬氨suan受體(NMDAR)ELISA試劑盒NMDARN-甲基-D-天冬氨suan受體elisa kitHuman N-methyl-D-aspartic Acid Receptor,NMDAR ELISA Kit
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