產(chǎn)品名稱：支氣管上皮樣細(xì)胞;HBE

規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號(hào)：YS-02X9853

細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn) ：細(xì)胞生長(zhǎng)良好,，形態(tài)正常

儲(chǔ)存條件：2℃-8℃,，避光儲(chǔ)存

運(yùn)輸條件：冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%,；Glutamax（invitrogen 35050061）,，1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070）,，1%,；雙抗，1%,。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3） 凍存液：90%血清,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

注意事項(xiàng)：

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài),，細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,，細(xì)胞密度適合，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,，過(guò)密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,，而且消化時(shí)不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過(guò)低,，10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好,，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107）,，一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管）,，10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個(gè)細(xì)胞）分成兩管,。

（3）消化和吹打,，切忌胰酶消化過(guò)度，吹打不可太用力,，最好不要吹出好多泡泡,。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打,。

（4）離心后加入凍存液,。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很?chē)?yán)格，我從10%-90%都用過(guò),，問(wèn)題不大,，個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛,！另外,，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置，放在4度冰箱預(yù)冷,。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,，移入凍存管。

（5）關(guān)于“慢凍",，傳統(tǒng)的方法,，LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好，4度2h,，-20度2h或更長(zhǎng),，-80度過(guò)夜，最后液氮,。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇,，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,，很方便，省了包棉花,、4度,、-20度了,。

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途,，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈,。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),，標(biāo)記劃線，加熱溶解,，補(bǔ)充水分,，測(cè)定酸堿度,，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計(jì)測(cè)定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi),。

（三）過(guò)濾：將玻璃漏斗置鐵架上,，再用人子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過(guò)濾至透明,。

（四）分裝：將過(guò)濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶?jī)?nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL,；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好,，準(zhǔn)備滅菌,。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法,。一般微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死,，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的,。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,，即壓力越大，蒸汽溫度就越高,。因此,，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好,。而且在濕熱情況下,，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性,，因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng),，殺菌效果好。

細(xì)胞特性：

1)】組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織,。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽(yáng)性,。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1,、 HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌。

5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：上皮樣,，不規(guī)則細(xì)胞,，貼壁培養(yǎng)。
CD93/C1qrp/FITC 熒光素標(biāo)記CD93抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Cripto-1(C-Terminus) 畸胎瘤衍化生長(zhǎng)因子抗原(表皮生長(zhǎng)因子相關(guān)肽)C端Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

抗/血管升壓素抗體  ADH/AVP 0.1ml

ZNF423 英文名稱： 鋅指蛋白423抗體 0.2ml

phospho-DNA PKcs (Ser2056) 英文名稱： 磷酸化DNA依賴性蛋白激酶抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-FANCD2(Ser222) 磷酸化FANCD2抗體 規(guī)格 0.1ml

Cripto-1(C-Terminus) 畸胎瘤衍化生長(zhǎng)因子抗原(表皮生長(zhǎng)因子相關(guān)肽)C端Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

GH human 人生長(zhǎng)因子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 COLEC12 凝集胎盤(pán)蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh NOS-2/iNOS 一氧化氮合成酶-2抗體(誘導(dǎo)型) 規(guī)格 0.1ml

Human Soluble protein-100,S-100 ELISA Kit 人S100蛋白 96T

TFE3 英文名稱： 轉(zhuǎn)錄因子E3 0.1ml

C6orf163 英文名稱： 6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框163抗體 0.1ml

 COLEC12 凝集胎盤(pán)蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rabbit  chicken IgG/HRP 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的兔抗雞IgG 0.1ml

FAR2 英文名稱： 脂肪酰A還原酶2抗體 0.2ml

GDNF家族受體α-1抗體  GFRα-1/GDNF 0.1ml

 phospho-c-Raf (Ser338) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化原癌基因c-Raf抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Smad1(Ser206) 磷酸化細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-1抗體 規(guī)格 0.1ml

Rabbit  Bovine IgG 兔抗IgG (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格： 1mg
支氣管上皮樣細(xì)胞;HBE海洋動(dòng)物（蝦貝類）高質(zhì)純化線粒體分離試劑盒10次大鼠水通道蛋白4（AQP-4）ELISA試劑盒,

活體細(xì)胞線粒體膜通道孔（MPTP）熒光檢測(cè)試劑盒20次鴨球蛋白E（IgE）ELISA試劑盒,

純化線粒體膜通道孔（MPTP）熒光檢測(cè)試劑盒20次神經(jīng)肽B（NKB）ELISA試劑盒--動(dòng)物，人

純化線粒體膜通道孔（MPTP）比色法檢測(cè)試劑盒20次堿性蛋白胨水

凍切片組織線粒體膜通道孔（MPTP）熒光檢測(cè)試劑盒50次人乙呋酮（AD）ELIS人乙呋酮（AD）ELISA試劑盒, A試劑盒,

純化線粒體凍存液（酶學(xué)和膜結(jié)構(gòu)保護(hù)）50毫升人補(bǔ)體1q（C1q）ELISA試劑盒,

純化線粒體凍存液（生物能量學(xué)保護(hù)）50毫升大鼠血纖蛋白原（Fbg）ELISA試劑盒,

純化線粒體II型L－3羥?；瑿oA 脫氫酶/β淀粉樣蛋白結(jié)合乙醇脫氫酶（HADHII/ABAD）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次倉(cāng)鼠組織蛋白酶K（cath-K）ELISA試劑盒,

細(xì)胞II型L－3羥?；瑿oA 脫氫酶/β淀粉樣蛋白結(jié)合乙醇脫氫酶（HADHII/ABAD）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次兔子可溶性血管粘附分子1（sVCAM-1）ELISA試劑盒,

組織II型L－3羥酰基－CoA 脫氫酶/β淀粉樣蛋白結(jié)合乙醇脫氫酶（HADHII/ABAD）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次抑制素（INH）ELISA試劑盒--動(dòng)物,，人

純化線粒體呼吸控制率（RCR）定量檢測(cè)試劑盒20次抗甲型肝炎病IgM抗體（anti-HAV）ELISA試劑盒--動(dòng)物,，人

純化線粒體磷氧比（ADP/O）定量檢測(cè)試劑盒20次煌綠黃嘧啶瓊脂

純化線粒體腫脹比色法測(cè)定試劑盒50次多黏類芽孢桿菌說(shuō)明書(shū)

活體細(xì)胞線粒體腫脹流式細(xì)胞儀測(cè)定試劑盒20次小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子AB（PDGF-AB）ELISA試劑盒,

純化線粒體腫脹流式細(xì)胞儀測(cè)定試劑盒20次小鼠17羥孕酮（17-OHP）ELISA試劑盒,