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甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)重組蛋白

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2023-03-21 20:21:05瀏覽次數(shù):304次

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供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Glyceraldehyde-3-Phosphate Dehydrogena
物種 Homo sapiens (Human,,人) 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
品牌 研生
甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)重組蛋白公司正在出售的產(chǎn)品:腸道腺病毒41型PCR檢測(cè)試劑盒腸道致細(xì)胞病變?nèi)斯聝翰《綪CR檢測(cè)試劑盒價(jià)格即腸道病毒72型PCR檢測(cè)試劑盒腸侵襲性大腸桿菌PCR檢測(cè)試劑盒腸道腺病毒PCR檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)雞痘病毒PCR檢測(cè)試劑盒

公司產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品屬性:

特點(diǎn):

標(biāo)記:標(biāo)記反應(yīng)簡(jiǎn)單,、溫和且很少抑制抗體活性,,將與抗體共價(jià)結(jié)合是一種非常簡(jiǎn)便,、直接的標(biāo)記方法。

酶標(biāo)記:酶標(biāo)記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成,,其應(yīng)用范圍非常廣泛,,結(jié)果即時(shí)可見、敏感性高,。

熒光標(biāo)記:熒光基團(tuán)AbFluorTM是新型的熒光標(biāo)記物之一,,產(chǎn)品覆蓋350-770nm。不同的AbFluor基團(tuán)經(jīng)恰當(dāng)?shù)募す饪砂l(fā)光,, 從而得知抗體的定位和待測(cè)抗原的分布情況,,主要用于細(xì)胞分選或高分辨率免疫染色,是一種非常好的亞細(xì)胞水平定位的方法,。

產(chǎn)品名稱:甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)重組蛋白   

物種:Homo sapiens (Human,,人)

英文名稱:Recombinant Glyceraldehyde-3-Phosphate Dehydrogenase (GAPDH)

G3PD; GAPD; Peptidyl-cysteine S-nitrosylase GAPDH

酶與激酶

代謝通路

心腦血管

肝膽病學(xué)

營(yíng)養(yǎng)代謝

物種:Homo sapiens (Human,人)

來源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位::分泌

預(yù)測(cè)分子量:17.5kDa

實(shí)際分子量:18kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:Gly2~Ser148 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)

性狀:凍干粉

純度:> 90%

等電點(diǎn):8.8

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

相關(guān)產(chǎn)品:
Recombinant Human CGGBP1宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human TPM4宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human HCN1宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human SPAG7宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

圖片6.png


標(biāo)簽選擇:

親和標(biāo)簽:蛋白重組表達(dá)過程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易,;另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶。蛋白標(biāo)簽可分兩類:一類是短肽類標(biāo)簽,;一類是長(zhǎng)肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達(dá),。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來分析。

不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,,大致步驟如下:

真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:

a.      選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞(常用的CHO和HEK293)

b.      表達(dá)載體的構(gòu)建

c.      無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提

d.      細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染

e.      表達(dá)小試,,條件優(yōu)化

f.       表達(dá)分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)

g.      大量表達(dá)

h.      親和純化

i.        檢測(cè)和鑒定

原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:

a.      選擇表達(dá)載體

b.      密碼子優(yōu)化

c.      基因合成/亞克隆

d.      轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株

e.      蛋白表達(dá)小試分析

f.       如果蛋白可溶,蛋白親和純化

g.      如果蛋白不可溶,,則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白,。

h.      鑒定,包括SDS-PAGE和WB鑒定

GZMH蛋白;表達(dá)蛋白的分析,、純化,、檢測(cè)

  誘導(dǎo)表達(dá)成功后,表達(dá)蛋白的分析,、純化,、檢測(cè)應(yīng)該順當(dāng),按一般的實(shí)驗(yàn)步驟做沒太大的問題,。

操作步驟

根據(jù)使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM,。混勻備用(PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加),。

1,、樣品前處理:

a)對(duì)于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS,、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍,。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,,使裂解液和細(xì)胞充分接觸,。

b)對(duì)于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散,。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,,再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀,。如果細(xì)胞量較多,,必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管,然后再裂解,。

c)對(duì)于組織樣品: 把切成細(xì)小的碎片,。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,,如果需要高濃度的蛋白樣品,,可以適當(dāng)減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,,直至充分裂解,。

2、后處理:

將裂解后

 的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,,取上清,,即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測(cè)定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作

Cytochrome C產(chǎn)品名稱: 細(xì)抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Cow, Horse, Rabbit, GuineaPig

CYP2R1產(chǎn)品名稱: 細(xì)胞色suP450 2R1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Horse, Rabbit

應(yīng)用類型: Phosphorylated英文名稱: beta I Tubulin (Loading Control)英文別名: 2810484G07Rik;

p21-ARC產(chǎn)品名稱: 肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白2/3復(fù)合物亞基3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Cow, Rabbit

MMP-1產(chǎn)品名稱: 基質(zhì)金屬蛋白mei-1抗體交叉反應(yīng): Mouse

HSP70產(chǎn)品名稱: 熱休克蛋白-70抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Rabbit

HNF4A產(chǎn)品名稱: 細(xì)胞核因子4α抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

NSE產(chǎn)品名稱: 神經(jīng)元特異性烯醇化mei/γ 烯醇化mei抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow

KMT3C產(chǎn)品名稱: 組蛋白賴氨suanN-甲基轉(zhuǎn)移mei3C抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Sheep

hnRNP DL產(chǎn)品名稱: 異質(zhì)核核糖核蛋白D樣蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Sheep
甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)重組蛋白人大皰性類天皰瘡抗體(BP)ELISA試劑盒BP大皰性類天皰瘡抗體elisa檢測(cè)試劑盒Human Bullous Pemphigoid,BP ELISA Kit

人大腸菌su(colicin)ELISA試劑盒colicin大腸菌suelisa kithuman colicin ELISA Kit

人存活su抗體/生存蛋白(Surv)ELISA試劑盒Surv存活su抗體/生存蛋白elisa kitHuman anti-Survivin antibody,Surv ELISA Kit

人脆性組氨suan三聯(lián)體(FHIT)ELISA試劑盒FHIT脆性組氨suan三聯(lián)體ELISA試劑盒Human FHIT ELISA Kit

人促胰液su/分泌su受體(SR)ELISA試劑盒SR促胰液su/分泌su受體elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human secretin receptor,SR ELISA Kit


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