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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應用領域 | 化工,生物產業(yè) |
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主要用途 | 僅供科研研究實驗 | 英文名稱 | Recombinant Fatty Acid Hydroxylase (FAAH) |
物種 | Mus musculus (Mouse,,小鼠) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
公司產品僅供科研實驗產品屬性:
特點:
標記:標記反應簡單,、溫和且很少抑制抗體活性,,將與抗體共價結合是一種非常簡便、直接的標記方法,。
酶標記:酶標記抗體是將酶與特異性抗體經適當方法連接而成,,其應用范圍非常廣泛,結果即時可見,、敏感性高,。
熒光標記:熒光基團AbFluorTM是新型的熒光標記物之一,產品覆蓋350-770nm,。不同的AbFluor基團經恰當?shù)募す饪砂l(fā)光,, 從而得知抗體的定位和待測抗原的分布情況,主要用于細胞分選或高分辨率免疫染色,,是一種非常好的亞細胞水平定位的方法,。
產品名稱:脂肪酸羥化酶(FAAH)重組蛋白
物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
英文名稱:Recombinant Fatty Acid Hydroxylase (FAAH)
FAXDC1; FA2H; Fatty Acid 2-Hydroxylase; Fatty Acid Hydroxylase Domain Containing 1; Fatty acid alpha-hydroxylase
酶與激酶
物種:Mus musculus (Mouse,,小鼠) 來源:原核表達 宿主E.coli 內毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定) 亞細胞定位::細胞膜 預測分子量:42.8kDa 實際分子量:46kDa(差異分析請參閱說明書) 片段與標簽:Asp57~Thr167 with N-terminal His and GST Tag 緩沖液成份:PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose. 性狀:凍干粉 純度:> 90% 等電點:4.7 應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
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標簽選擇:
親和標簽:蛋白重組表達過程中采用親和標簽融合表達有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易,;另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶。蛋白標簽可分兩類:一類是短肽類標簽,;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達,。使用不同的蛋白標簽需要根據(jù)具體案例來分析。
不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,,大致步驟如下:
真核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:
a. 選擇表達載體和宿主細胞(常用的CHO和HEK293)
b. 表達載體的構建
c. 無內毒素的質粒抽提
d. 細胞瞬時轉染
e. 表達小試,,條件優(yōu)化
f. 表達分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)
g. 大量表達
h. 親和純化
i. 檢測和鑒定
原核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:
a. 選擇表達載體
b. 密碼子優(yōu)化
c. 基因合成/亞克隆
d. 轉化表達菌株
e. 蛋白表達小試分析
f. 如果蛋白可溶,蛋白親和純化
g. 如果蛋白不可溶,,則需要變復性來制備可溶蛋白,。
h. 鑒定,包括SDS-PAGE和WB鑒定
GZMH蛋白,;表達蛋白的分析,、純化、檢測
誘導表達成功后,,表達蛋白的分析,、純化,、檢測應該順當,,按一般的實驗步驟做沒太大的問題。
操作步驟 :
根據(jù)使用量,,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM?;靹騻溆茫≒MSF 現(xiàn)用現(xiàn)加),。
1,、樣品前處理:
a)對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS,、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍,。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,,使裂解液和細胞充分接觸,。
b)對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散,。按照6孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,,再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀,。如果細胞量較多,,必需分裝成 50-100 萬細胞/管,然后再裂解,。
c)對于組織樣品: 把切成細小的碎片,。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液,,如果需要高濃度的蛋白樣品,,可以適當減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,,直至充分裂解,。
2、后處理:
將裂解后
的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,,取上清,,即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定、SDS-PAGE,、Western blotting 和免疫沉淀等操作
CA7產品名稱: mei7抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
Cyclin K產品名稱: 周期suK抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Sheep
CEAM3產品名稱: 胚抗原相關細胞粘附分子3抗體交叉反應: Human
EBPL產品名稱: EBPL蛋白抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
應用類型: Other英文名稱: EEF1A1英文別名: Elongation factor 1-alpha 1; EF-1-alpha-1; Elongation factor Tu (EF-Tu); Eukaryotic elongation factor 1 A-1 (eEF1A-1); Leukocyte receptor cluster member 7; EF1A1_HUMAN; EEF1A; EF1A; LENG7;
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CCL14/SCYL2產品名稱: 嗜suan粒細胞趨化蛋白14抗體交叉反應: Human, Rabbit
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Hirudin產品名稱: 水蛭su抗體標記: Unconjugated
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