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當前位置:上海研生實業(yè)有限公司>>天然蛋白、重組蛋白>>重組蛋白/RP>> γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶1(gGT1)重組蛋白
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所 在 地上海市
更新時間:2023-03-21 19:37:29瀏覽次數(shù):266次
聯(lián)系我時,,請告知來自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應用領域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
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主要用途 | 僅供科研實驗 | 英文名稱 | Recombinant Gamma-Glutamyltransferase 1 (gGT1) |
種屬 | Homo sapiens (Human,,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
公司產(chǎn)品僅供科研實驗產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶1(gGT1)重組蛋白
物種:Homo sapiens (Human,人)
英文名稱:Recombinant Gamma-Glutamyltransferase 1 (gGT1)
CD224; G-GT1; GTG; Gamma-glutamyltranspeptidase 1; Glutathione hydrolase 1; Leukotriene-C4 hydrolase;
酶與激酶
感染免疫
肝膽病學
物種:Homo sapiens (Human,,人) 來源:原核表達 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定) 亞細胞定位::分泌 預測分子量:20.7kDa 實際分子量:21kDa(差異分析請參閱說明書) 片段與標簽:Ser122~Ser299 with N-terminal His Tag 緩沖液成份:PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose. 性狀:凍干粉 純度:> 97% 等電點:6.5 應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
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標簽選擇:
親和標簽:蛋白重組表達過程中采用親和標簽融合表達有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易,;另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶。蛋白標簽可分兩類:一類是短肽類標簽,;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達,。使用不同的蛋白標簽需要根據(jù)具體案例來分析。
不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,,大致步驟如下:
真核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:
a. 選擇表達載體和宿主細胞(常用的CHO和HEK293)
b. 表達載體的構(gòu)建
c. 無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提
d. 細胞瞬時轉(zhuǎn)染
e. 表達小試,,條件優(yōu)化
f. 表達分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)
g. 大量表達
h. 親和純化
i. 檢測和鑒定
原核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:
a. 選擇表達載體
b. 密碼子優(yōu)化
c. 基因合成/亞克隆
d. 轉(zhuǎn)化表達菌株
e. 蛋白表達小試分析
f. 如果蛋白可溶,蛋白親和純化
g. 如果蛋白不可溶,,則需要變復性來制備可溶蛋白,。
h. 鑒定,包括SDS-PAGE和WB鑒定
GZMH蛋白,;表達蛋白的分析,、純化、檢測
誘導表達成功后,,表達蛋白的分析,、純化、檢測應該順當,,按一般的實驗步驟做沒太大的問題,。
操作步驟 :
根據(jù)使用量,,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM,?;靹騻溆茫≒MSF 現(xiàn)用現(xiàn)加)。
1,、樣品前處理:
a)對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍,。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,,使裂解液和細胞充分接觸,。
b)對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散,。按照6孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,,再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀,。如果細胞量較多,,必需分裝成 50-100 萬細胞/管,然后再裂解,。
c)對于組織樣品: 把切成細小的碎片,。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液,,如果需要高濃度的蛋白樣品,,可以適當減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,,直至充分裂解,。
2、后處理:
將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,,取上清,,即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定、SDS-PAGE,、Western blotting 和免疫沉淀等操作
特點:
標記:標記反應簡單,、溫和且很少抑制抗體活性,將與抗體共價結(jié)合是一種非常簡便,、直接的標記方法,。
酶標記:酶標記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當方法連接而成,其應用范圍非常廣泛,,結(jié)果即時可見,、敏感性高,。
熒光標記:熒光基團AbFluorTM是新型的熒光標記物之一,產(chǎn)品覆蓋350-770nm,。不同的AbFluor基團經(jīng)恰當?shù)募す饪砂l(fā)光,, 從而得知抗體的定位和待測抗原的分布情況,主要用于細胞分選或高分辨率免疫染色,,是一種非常好的亞細胞水平定位的方法,。
beta Amyloid 31-35產(chǎn)品名稱: β淀粉樣肽(31-35)/Aβ 31-35 抗體交叉反應: MAP2產(chǎn)品名稱: 微管相關蛋白2抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat
NRBP2產(chǎn)品名稱: 核受體結(jié)合蛋白2抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Cat
HELZ產(chǎn)品名稱: 人腫蛋白抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat
14-3-3 theta;產(chǎn)品名稱: 14-3-3τ蛋白抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Sheep
Phospho-FAK (Tyr407)產(chǎn)品名稱: 粘著斑激mei抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
TLR6產(chǎn)品名稱: Toll樣受體6抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Pig, Horse
CK18產(chǎn)品名稱: 細胞角蛋白18單克隆抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat
應用類型: Other英文名稱: phospho-SMAD5 (Ser463 + Ser465)英文別名: Smad5(S463/465); SMAD5
γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶1(gGT1)重組蛋白人巨噬細胞趨化因子(MCF)ELISA試劑盒MCF巨噬細胞趨化因子elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human macrophage chemotatic factor,MCF ELISA Kit
人巨噬細胞集落刺激因子受體(M-CSFR)ELISA試劑盒M-CSFR巨噬細胞集落刺激因子受體elisa檢測試劑盒Human M-CSFR ELISA Kit
人巨噬細胞刺激蛋白(MSP)ELISA試劑盒MSP巨噬細胞刺激蛋白elisa kitHuman macrophage stimulating protein,MSP ELISA Kit
人酒石suan鹽抵抗的suan性磷suanmei(TRAP)ELISA試劑盒TRAP酒石suan鹽抵抗的suan性磷suanmeiELISA試劑盒Human Tartrate Resistant Acid Phosphatase,TRAP ELISA Kit
人精子相關抗原9(SPAG9)抗體ELISA試劑盒SPAG9精子相關抗原9elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human sperm associated antigen 9 (SPAG9) antibody ELISA Kit
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