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當前位置:上海研生實業(yè)有限公司>>天然蛋白、重組蛋白>>重組蛋白/RP>> 過氧化還原酶5(PRDX5)重組蛋白
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所 在 地上海市
更新時間:2023-03-22 09:43:02瀏覽次數(shù):289次
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主要用途 | 僅供科研實驗 | 英文名稱 | Recombinant Peroxiredoxin 5 (PRDX5) |
種屬 | Homo sapiens (Human,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
公司產(chǎn)品僅供科研實驗產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:過氧化還原酶5(PRDX5)重組蛋白
物種:Homo sapiens (Human,,人)
英文名稱:Recombinant Peroxiredoxin 5 (PRDX5)
PLP; PRDX6; ACR1; PMP20; PRXV; SBBI10; Thioredoxin Peroxidase PMP20; Peroxisomal Antioxidant Enzyme; TPx Type VI; Liver Tissue 2D-Page Spot 71B; Alu Co-Repressor 1
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,,人) 來源:原核表達 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定) 亞細胞定位::線粒體 預測分子量:18.5kDa 實際分子量:20kDa(差異分析請參閱說明書) 片段與標簽:Met1~Leu162 with N-terminal His Tag 緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300) 性狀:凍干粉 純度:> 90% 等電點:6.7 應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
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標簽選擇:
親和標簽:蛋白重組表達過程中采用親和標簽融合表達有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易;另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶,。蛋白標簽可分兩類:一類是短肽類標簽,;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達。使用不同的蛋白標簽需要根據(jù)具體案例來分析,。
不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,,大致步驟如下:
真核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:
a. 選擇表達載體和宿主細胞(常用的CHO和HEK293)
b. 表達載體的構(gòu)建
c. 無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提
d. 細胞瞬時轉(zhuǎn)染
e. 表達小試,,條件優(yōu)化
f. 表達分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)
g. 大量表達
h. 親和純化
i. 檢測和鑒定
原核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:
a. 選擇表達載體
b. 密碼子優(yōu)化
c. 基因合成/亞克隆
d. 轉(zhuǎn)化表達菌株
e. 蛋白表達小試分析
f. 如果蛋白可溶,蛋白親和純化
g. 如果蛋白不可溶,,則需要變復性來制備可溶蛋白,。
h. 鑒定,包括SDS-PAGE和WB鑒定
GZMH蛋白,;表達蛋白的分析,、純化、檢測
誘導表達成功后,,表達蛋白的分析,、純化、檢測應該順當,,按一般的實驗步驟做沒太大的問題,。
操作步驟 :
根據(jù)使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM,。混勻備用(PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加),。
1,、樣品前處理:
a)對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS,、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍,。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,,使裂解液和細胞充分接觸,。
b)對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散,。按照6孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,,再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀,。如果細胞量較多,,必需分裝成 50-100 萬細胞/管,然后再裂解,。
c)對于組織樣品: 把切成細小的碎片,。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液,,如果需要高濃度的蛋白樣品,,可以適當減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解,。
2,、后處理:
將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,,即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定,、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作
特點:
標記:標記反應簡單,、溫和且很少抑制抗體活性,,將與抗體共價結(jié)合是一種非常簡便、直接的標記方法,。
酶標記:酶標記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當方法連接而成,,其應用范圍非常廣泛,結(jié)果即時可見,、敏感性高,。
熒光標記:熒光基團AbFluorTM是新型的熒光標記物之一,產(chǎn)品覆蓋350-770nm,。不同的AbFluor基團經(jīng)恰當?shù)募す饪砂l(fā)光,, 從而得知抗體的定位和待測抗原的分布情況,主要用于細胞分選或高分辨率免疫染色,,是一種非常好的亞細胞水平定位的方法,。
Netrin 4產(chǎn)品名稱: 軸突生長誘向因子4抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit
Neuropeptide Q產(chǎn)品名稱: 神經(jīng)肽Q抗體交叉反應: Human, Rat
hnRNP L產(chǎn)品名稱: 異質(zhì)核糖核蛋白L抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit, GuineaPig
SIGLEC9產(chǎn)品名稱: 唾液suan結(jié)合球蛋白樣凝集su9抗體交叉反應: Human
RNF6產(chǎn)品名稱: 環(huán)指蛋白6抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Horse, Sheep
PNPLA6/NTE產(chǎn)品名稱: 含patatin樣磷脂mei6抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse
CDKN2B/p15 INK4b產(chǎn)品名稱: 細胞周期蛋白依賴性激mei劑2B抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Rabbit
DOPEY1產(chǎn)品名稱: 遲鈍蛋白家族1抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep
NLGN4X產(chǎn)品名稱: 神經(jīng)元X連鎖蛋白/兒童自閉相關(guān)蛋白抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Horse, Zebrafish, Chimpanzee
應用類型: Other英文名稱: phospho-Cyclin E1 (Thr77)英文別名: Cyclin E1(T77); Cyclin E1 (phospho-Thr77); Cyclin E1 (phospho-T77); CCNE 1; CCNE; CCNE1; Cyclin Es; Cyclin Et; CyclinE; G1/S specific cyclin E; G1/S-specific cyclin-E1; CCNE1_HUMAN; pCCNE1.
過氧化還原酶5(PRDX5)重組蛋白人銜接因子相關(guān)蛋白復合體2μ1(AP2μ1)ELISA試劑盒AP2μ1銜接因子相關(guān)蛋白復合體2μ1elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Adaptor Related Protein Complex 2 Mu 1(AP2m1)ELISA Kit
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人酰基羧suan水解mei(AOAH)ELISA試劑盒AOAH?;萻uan水解meielisa kitHuman Acyloxyacyl Hydrolase(AOAH)ELISA Kit
人?;视图?/span>mei(AGK)ELISA試劑盒AGK酰基甘油激meiELISA試劑盒Human Acylglycerol Kinase(AGK)ELISA Kit
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