商品介紹：

公司產(chǎn)品僅供科研使用,，不得用于臨床！

蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白,。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）,。

3.通過親和，離子交換,，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白,。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

相關(guān)產(chǎn)品：

磷酸甘油酸變位酶2(PGAM2)重組蛋白R(shí)ecombinant Chitinase 1 (CHIT1)

磷酸甘油酸變位酶1(PGAM1)重組蛋白R(shí)ecombinant Carbohydrate Sulfotransferase 9 (CHST9)

磷酸甘露糖酶1(PMM1)重組蛋白R(shí)ecombinant Cystathionine Beta Synthase (CbS)

磷酸二酯酶9A(PDE9A)重組蛋白R(shí)ecombinant Lactamase Beta (LACTb)   
操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer,，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,，離心10000轉(zhuǎn)/分,，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,，即為全蛋白提取物,，蛋白定量（Bradford法、BCA法）,；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后,，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑,， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

4． 細(xì)胞洗滌后,，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer,，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上,，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm,，4℃離心15min,，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法,、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。

JEV E產(chǎn)品名稱: 豬乙腦毒包膜蛋白抗體產(chǎn)品別名: 豬乙型腦毒E蛋白;

MACF1/ACF7產(chǎn)品名稱: 肌動(dòng)蛋白交聯(lián)蛋白家族7抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Cow, Sheep

MAZ產(chǎn)品名稱: 鋅指蛋白801抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

Bif產(chǎn)品名稱: Bax相互作用因子1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse

Acetoacetyl-CoA synthetase產(chǎn)品名稱: 脂肪酰輔meiA家族成員1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep

HEATR6產(chǎn)品名稱: 乳增強(qiáng)蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

HISPPD2A/IP6 Kinase產(chǎn)品名稱: 組氨suansuan性磷suanmei結(jié)構(gòu)域蛋白2A抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

OPALIN/TMEM10產(chǎn)品名稱: 跨膜蛋白10抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Cow

LYSMD1產(chǎn)品名稱: LYSMD1蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Rabbit, Sheep

Collagen X產(chǎn)品名稱: Ⅹ型膠原抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse   

基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP2)活性蛋白大鼠維甲suan受體應(yīng)答蛋白2(RARRES2)ELISA試劑盒RARRES2維甲suan受體應(yīng)答蛋白2ELISA試劑盒Rat Retinoic acid receptor responder protein 2,RARRES2 ELISA kit

大鼠微纖絲相關(guān)糖蛋白3(MFAP3)ELISA試劑盒MFAP3微纖絲相關(guān)糖蛋白3elisamei聯(lián)免疫試劑盒Rat Microfibril-associated glycoprotein 3,MFAP3 ELISA kit

大鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(RAGE)ELISA試劑盒RAGE晚期糖基化終末產(chǎn)物受體elisa檢測(cè)試劑盒Rat receptor for advanced glycation end products,RAGE ELISA Kit

大鼠晚期糖基化端產(chǎn)物特異受體(AGER)ELISA試劑盒AGER晚期糖基化端產(chǎn)物特異受體elisa kitRat Advanced glycosylation end product-specific receptor,AGER ELISA kit

大鼠突觸體su/突觸su(Syp/SYN)ELISA試劑盒Syp/SYN突觸體su/突觸suELISA試劑盒Rat Synaptophysin,Syp ELISA kit  
注意事項(xiàng)：

1,、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時(shí)間有所不同，應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時(shí)間,。

2,、雖然作用溫和，但能硬化組織,，固定時(shí)間過久會(huì)導(dǎo)致組織變脆,，切片時(shí)易碎。因此固定時(shí)間通常不宜超過 24 小時(shí),。

3,、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基，使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙,。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,，使之不能充分暴露，可造成假陰性的染色,，影響免疫組化結(jié)果,。因此，4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測(cè)時(shí),，有時(shí)需要對(duì)抗原先進(jìn)行修復(fù),，然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。

4,、本產(chǎn)品對(duì)人體有害,，操作時(shí)請(qǐng)小心，并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi),。

5,、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作