蛋白表達及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白,。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換,，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白,。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量,。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性,。
公司產品僅供科研使用,，不得用于臨床,！

商品介紹：

相關產品：

羧酸酯酶3(CES3)重組蛋白英文名稱：Recombinant Carboxylesterase 3 (CES3)Mus musculus (Mouse,，小鼠)

羧酸酯酶5A(CES5A)活性蛋白英文名稱：Active Carboxylesterase 5A (CES5A)Homo sapiens (Human,，人)

羧酸酯酶5A(CES5A)重組蛋白英文名稱：Recombinant Carboxylesterase 5A (CES5A)Homo sapiens (Human，人)

羧肽酶A1(CPA1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Carboxypeptidase A1, Pancreatic (CPA1)Rattus norvegicus (Rat,，大鼠)   

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻,。冰上保存數分鐘待用,。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊,，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,，注意低溫操作,；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分,，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中,，即為全蛋白提取物,，蛋白定量（Bradford法,、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融,。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細胞，吸去培養(yǎng)基后,，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數次以盡量去除培養(yǎng)液,；

2． 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中,， 1000轉/分離心10 min,，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑,， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,，混勻。冰上保存數分鐘待用,。

4． 細胞洗滌后,，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer,，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上,，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm,，4℃離心15min,，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）,；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融,。

注意事項：

1、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,，應當根據細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調整固定時間,。

2、雖然作用溫和,，但能硬化組織,，固定時間過久會導致組織變脆，切片時易碎,。因此固定時間通常不宜超過 24 小時,。

3,、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基，使抗原決定簇的三維構象出現(xiàn)空間障礙,。分子間交聯(lián)形成的網格結構可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,，使之不能充分暴露，可造成假陰性的染色,，影響免疫組化結果,。因此，4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,，有時需要對抗原先進行修復,，然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。

4,、本產品對人體有害,，操作時請小心，并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內,。

5,、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作 
SOX30產品名稱: 轉錄因子SOX30抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Sheep

Phospho-LAT (Tyr171)產品名稱: T細胞活化連接蛋白抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

應用類型: Methylated英文名稱: Ractopamine英文別名: 4-{3-[2-Hydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)ethyl]amibutylphel hydrochloride｝.

EPB41L5產品名稱: EPB41L5蛋白抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Horse, Rabbit

Glutathione Reductase產品名稱: 還原mei抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow

FATE1產品名稱: FATE1蛋白抗體交叉反應: Human

CATSPER3產品名稱: 陽離子通道相關蛋白3抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Rabbit

PLEKHA3產品名稱: 含普列克底物蛋白家族A成員3抗體交叉反應: Human, Mouse, Dog, Pig, Cow, Sheep

LRRC67產品名稱: 富含亮氨suan重復蛋白67抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Rabbit

SAR1A產品名稱: SAR1蛋白抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Pig, Cow   

二肽基肽酶3(DPP3)重組蛋白人Vertnin蛋白(VRTN)ELISA試劑盒VRTNVertnin蛋白elisa kitHuman Vertnin(VRTN)ELISA Kit

人Vav3癌基因(VAV3)ELISA試劑盒VAV3Vav3癌基因ELISA試劑盒Human Vav 3 Oncogene(VAV3)ELISA Kit

人Vav2癌基因(VAV2)ELISA試劑盒VAV2Vav2癌基因elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Vav 2 Oncogene(VAV2)ELISA Kit

人Vav1癌基因(VAV1)ELISA試劑盒VAV1Vav1癌基因elisa檢測試劑盒Human Vav 1 Oncogene(VAV1)ELISA Kit

人Vasorin蛋白(VASN)ELISA試劑盒VASNVasorin蛋白elisa kitHuman Vasorin(VASN)ELISA Kit