細(xì)胞特性：

1)】組織來源于實(shí)驗(yàn)動物的正常眼組織。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽性。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌,。

5)細(xì)胞生長方式：上皮樣，不規(guī)則細(xì)胞,，貼壁培養(yǎng),。
產(chǎn)品名稱：肺癌細(xì)胞;NCI-H460

規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號：YS-02X9803

細(xì)胞生長實(shí)驗(yàn) ：細(xì)胞生長良好，形態(tài)正常

儲存條件：2℃-8℃,，避光儲存

運(yùn)輸條件：冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%,；Glutamax（invitrogen 35050061）,，1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070）,，1%,；雙抗，1%,。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3） 凍存液：90%血清,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

注意事項(xiàng)：

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài),，細(xì)胞最好在對數(shù)生長期,，細(xì)胞密度適合，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合，過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,，而且消化時不容易分散,；

（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107）,，一瓶凍一管（1.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個細(xì)胞）分成兩管,。

（3）消化和吹打,，切忌胰酶消化過度，吹打不可太用力,，最好不要吹出好多泡泡,。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打,。

（4）離心后加入凍存液,。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格,，我從10%-90%都用過,，問題不大，個人認(rèn)為10%-20%可以了,，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛,！另外，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,，放在4度冰箱預(yù)冷,。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管,。

（5）關(guān)于“慢凍",，傳統(tǒng)的方法，LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,，4度2h,，-20度2h或更長，-80度過夜,，最后液氮,。對于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室，推薦使用程序降溫盒,，內(nèi)裝異丙醇,，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便,，省了包棉花,、4度、-20度了。

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途,，選擇適宜的培養(yǎng)基,，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),，標(biāo)記劃線,，加熱溶解，補(bǔ)充水分,，測定酸堿度,，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計(jì)測定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi),。

（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上,，再用人子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明,。

（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL,；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好,，準(zhǔn)備滅菌,。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法,。一般微生物的營養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死,，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的,。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,，即壓力越大，蒸汽溫度就越高,。因此,，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好,。而且在濕熱情況下,，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性,，因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng),，殺菌效果好。

Pdk4/FITC 熒光素標(biāo)記丙酮酸脫氫酶激酶4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Donkey  Goat IgG/FITC 熒光素標(biāo)記驢抗羊IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.3ml

抗內(nèi)膜抗體  EMAb 0.2ml

Donkey  Goat IgG/Cy5 Cy5標(biāo)記的驢抗羊IgG 0.1ml

FADD 英文名稱： Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-Tau protein(Thr231) 磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

Donkey  Goat IgG/FITC 熒光素標(biāo)記驢抗羊IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.3ml

XRCC1(X-ray Repair Cross Complementing 1) X射線修復(fù)交叉互補(bǔ)蛋白/細(xì)胞堿基切除修復(fù)基因抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

 phospho-Beta-catenin(Tyr142) 磷酸化β 連環(huán)素蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh PCDHGB5 原鈣粘蛋白γB5抗體 規(guī)格 0.2ml

CDH1 Kit Human 人 E-Cadherin / CDH1 / E-cad / CD324 ELISA配對抗體 ELISA

THSD1 英文名稱： 血小板跨膜反應(yīng)蛋白1抗體 0.2ml

Phospho-cdc2 (Tyr15) 英文名稱： 磷酸化周期素依賴激酶2抗體 0.1ml

 phospho-Beta-catenin(Tyr142) 磷酸化β 連環(huán)素蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rabbit  human IgM 兔抗人IgM 1mg

C9orf59 英文名稱： 9號染色體開放閱讀框59抗體 0.2ml

缺氧誘導(dǎo)因子1α 抗體  HIF-1α 0.1ml

 PKN2 /FITC 熒光素標(biāo)記蛋白激酶N2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-ROCK1(Thr455/Ser456) 磷酸化Rho相關(guān)蛋白激酶1抗體 規(guī)格 0.1ml

Human Fibrinogen (親和純化)人纖維蛋白原Multi-class antibodies規(guī)格： 10mg
肺癌細(xì)胞;NCI-H460硫酸腺嘌呤(標(biāo)準(zhǔn)品)西瑞香素抗原譜學(xué)分析技術(shù)試劑盒

6-氯咪唑并[1,2-b]噠喜樹堿SELDI蛋白質(zhì)譜分析技術(shù)試劑盒

磷酸腺嘌呤,，B4細(xì)辛高容量熒光篩選技術(shù)試劑盒

次 細(xì)辛脂素高通量遠(yuǎn)紅外篩選技術(shù)試劑盒

鳥嘌呤 夏佛塔苷高效液相色譜（HPLC）分析

鳥嘌呤 (標(biāo)準(zhǔn)品)仙茅苷紅外光譜（ESR）分析

N-芐基吡咯烷-3-甲酸甲酯腺苷熒光定量分析

5-溴-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶相思豆堿紫外可見光分析