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當(dāng)前位置:上海研生實(shí)業(yè)有限公司>>天然蛋白、重組蛋白>>重組蛋白/RP>> 磷酸鹽胞苷轉(zhuǎn)移酶1β(PCYT1b)重組蛋白
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所 在 地上海市
更新時間:2023-03-22 20:25:27瀏覽次數(shù):295次
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主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant Phosphate Cytidylyltransferase 1, Chol |
種屬 | Mus musculus (Mouse,小鼠) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
公司產(chǎn)品僅供科研使用,,不得用于臨床,!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 物種 |
磷酸鹽胞苷轉(zhuǎn)移酶1β(PCYT1b)重組蛋白 | Recombinant Phosphate Cytidylyltransferase 1, Choline Beta (PCYT1b) | Mus musculus (Mouse,小鼠) |
商品介紹:
CTB; CCTB; CCT-beta; Phosphorylcholine transferase B; CTP:phosphocholine cytidylyltransferase B 酶與激酶 物種:Mus musculus (Mouse,,小鼠) 來源:原核表達(dá) 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定) 亞細(xì)胞定位::分泌 預(yù)測分子量:31.7kDa 實(shí)際分子量:27&31kDa(差異分析請參閱說明書) 片段與標(biāo)簽:His62~Thr295 with N-terminal His Tag 緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.) 性狀:凍干粉 純度:> 90% 等電點(diǎn):- 應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,,通過瞬時表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白,。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,,離子交換,,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。
5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性,。
相關(guān)產(chǎn)品:
脂肪酶I(LIPI)重組蛋白英文名稱:Recombinant Lipase I (LIPI)Homo sapiens (Human,人)
脂肪酸合酶(FASN)重組蛋白英文名稱:Recombinant Fatty Acid Synthase (FASN)Homo sapiens (Human,,人)
脂肪酸羥化酶(FAAH)重組蛋白英文名稱:Recombinant Fatty Acid Hydroxylase (FAAH)Mus musculus (Mouse,,小鼠)
脂肪酸去飽和酶1(FADS1)卵白蛋白偶聯(lián)物英文名稱:OVA Conjugated Fatty Acid Desaturase 1 (FADS1)Mus musculus (Mouse,小鼠)
注意事項(xiàng):
1,、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。
2,、雖然作用溫和,,但能硬化組織,固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆,,切片時易碎,。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。
3,、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,,使之不能充分暴露,,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果,。因此,,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測時,,有時需要對抗原先進(jìn)行修復(fù),然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作,。
4,、本產(chǎn)品對人體有害,操作時請小心,,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi),。
5、為了您的安全和健康,,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作,;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min,;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法,、BCA法),;
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,,吸去培養(yǎng)基后,,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑,, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用,。
4. 細(xì)胞洗滌后,,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,,溫和振蕩15 min,;
6. 14,000rpm,,4℃離心15min,,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法),;
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。
ZNF114產(chǎn)品名稱: 鋅指蛋白114抗體交叉反應(yīng): Human
C21orf58產(chǎn)品名稱: 21號染色體開放閱讀框58抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Horse
Factor I light chain產(chǎn)品名稱: 補(bǔ)體因子I輕鏈抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Cow, Horse
DUSP7產(chǎn)品名稱: 雙特異性蛋白磷suanmei7抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
MYL9產(chǎn)品名稱: 肌球蛋白調(diào)節(jié)多肽9(平滑肌亞型)抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep
P2RX7產(chǎn)品名稱: 嘌呤受體P2X7抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Horse, Rabbit
Sema3A產(chǎn)品名稱: 臂板蛋白3A抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat
APOL1產(chǎn)品名稱: 載脂蛋白L1抗體交叉反應(yīng): Human
DMAP1產(chǎn)品名稱: DNA甲基轉(zhuǎn)移mei相關(guān)蛋白1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Rabbit, Sheep
GALNT3產(chǎn)品名稱: GALNT3蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit
磷酸鹽胞苷轉(zhuǎn)移酶1β(PCYT1b)重組蛋白人Muskelin人1蛋白(MKLN1)ELISA試劑盒MKLN1Muskelin1蛋白elisa kitHuman Muskelin 1(MKLN1)ELISA Kit
人MRG結(jié)合蛋白(MRGBP)ELISA試劑盒MRGBPMRG結(jié)合蛋白ELISA試劑盒Human MRG-Binding Protein(MRGBP)ELISA Kit
人Midline人2蛋白(MID2)ELISA試劑盒MID2Midline2蛋白elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Midline 2(MID2)ELISA Kit
人Midline人1蛋白(MID1)ELISA試劑盒MID1Midline1蛋白elisa檢測試劑盒Human Midline 1(MID1)ELISA Kit
人Midasin蛋白(MDN1)ELISA試劑盒MDN1Midasin蛋白elisa kitHuman Midasin(MDN1)ELISA Kit
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