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當(dāng)前位置:上海研生實(shí)業(yè)有限公司>>天然蛋白,、重組蛋白>>活性蛋白/AP>> 羧酸酯酶5A(CES5A)活性蛋白
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所 在 地上海市
更新時間:2023-03-23 08:49:15瀏覽次數(shù):321次
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主要用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Active Carboxylesterase 5A (CES5A) |
物種 | Homo sapiens (Human,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
公司產(chǎn)品僅供科研使用,,不得用于臨床,!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 物種 |
羧酸酯酶5A(CES5A)活性蛋白 | Active Carboxylesterase 5A (CES5A) | Homo sapiens (Human,人) |
商品介紹:
CES7; CES4C1; CES5; CAUXIN; Carboxylesterase-like urinary excreted protein homolog 酶與激酶 物種:Homo sapiens (Human,,人) 緩沖液成份:PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose. 性狀:凍干粉 純度:> 90% 等電點(diǎn):5.9 應(yīng)用:Cellculture;ActivityAssays. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞,,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白,。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清),。
3.通過親和,離子交換,,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白,。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
相關(guān)產(chǎn)品:
甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)重組蛋白Recombinant Ribonuclease A9 (RNASE9)
甘油磷酸二酯磷酸二酯酶1(GDE1)重組蛋白Recombinant Ubiquitin Specific Peptidase 7 (USP7)
甘露糖磷酸異構(gòu)酶(MPI)重組蛋白Recombinant G Protein Coupled Receptor Kinase 6 (GRK6)
甘露糖苷酶α2B類成員1(MAN2B1)重組蛋白Recombinant G Protein Coupled Receptor Kinase 4 (GRK4)
注意事項(xiàng):
1,、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。
2,、雖然作用溫和,,但能硬化組織,固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆,,切片時易碎,。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。
3,、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,,使之不能充分暴露,,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果,。因此,,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進(jìn)行修復(fù),,然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作,。
4、本產(chǎn)品對人體有害,,操作時請小心,,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
5,、為了您的安全和健康,,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,,離心10000轉(zhuǎn)/分,,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,,即為全蛋白提取物,,蛋白定量(Bradford法,、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中,, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑,, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。
4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min,;
6. 14,000rpm,,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法,、BCA法),;
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
LDB2產(chǎn)品名稱: LDB2蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit, Cat
TSPEAR產(chǎn)品名稱: 早期未分化視網(wǎng)膜及晶狀體蛋白EURL抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Cow, Horse
Syntaxin 13產(chǎn)品名稱: 神經(jīng)突觸su13抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep
PDXK產(chǎn)品名稱: 吡哆醛激mei單克隆抗體交叉反應(yīng): Human
MYL6B產(chǎn)品名稱: 肌球蛋白輕鏈多肽6B抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
NARC1/PCSK9產(chǎn)品名稱: 神經(jīng)細(xì)胞凋亡調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)化蛋白1/前蛋白轉(zhuǎn)化mei枯草溶菌su9抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat
PID1產(chǎn)品名稱: 磷suan相互作用結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Chicken, Rabbit
human CD4/PE-Cy3產(chǎn)品名稱: PE-Cy3標(biāo)記小鼠抗人CD4單克隆抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian
phospho-GATA6 (Tyr271)產(chǎn)品名稱: GATA結(jié)合蛋白6抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Sheep
TET3產(chǎn)品名稱: 甲基胞嘧啶雙加氧meiTET3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Sheep
羧酸酯酶5A(CES5A)活性蛋白兔熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒HSP-90兔熱休克蛋白90elisa kitRabbit Heat Shock Protein 90,HSP-90 ELISA Kit
兔熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒HSP-70兔熱休克蛋白70ELISA試劑盒Rabbit Heat Shock Protein 70,HSP-70 ELISA Kit
兔熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒HSP-40兔熱休克蛋白40elisamei聯(lián)免疫試劑盒Rabbit Heat Shock Protein 40,HSP-40 ELISA Kit
兔熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒HSP-20兔熱休克蛋白20elisa檢測試劑盒Rabbit Heat Shock Protein 20,HSP-20 ELISA Kit
兔去甲腎上腺su(NA)ELISA試劑盒NA兔去甲腎上腺suelisa kitRabbit Noradrenaline,NA ELISA Kit
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