產(chǎn)品名稱：大鼠肝癌細(xì)胞 ;H4-II-E-C3

規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號：YS-02X9849

細(xì)胞生長實驗 ：細(xì)胞生長良好，形態(tài)正常

儲存條件：2℃-8℃,，避光儲存

運輸條件：冰袋冷藏運輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞特性：

1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織,。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽性,。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%,。

4)不含有 HIV-1,、 HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌,。

5)細(xì)胞生長方式：上皮樣，不規(guī)則細(xì)胞,，貼壁培養(yǎng),。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,；Glutamax（invitrogen 35050061），1%,；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070）,，1%；雙抗,，1%,。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

注意事項：

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài),，細(xì)胞最好在對數(shù)生長期,，細(xì)胞密度適合，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,，過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,，而且消化時不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過低,，10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶凍一管（1.5ml凍存管）,，10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個細(xì)胞）分成兩管,。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過度,，吹打不可太用力,，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,，不是加入凍存液再吹打,。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格,，我從10%-90%都用過,，問題不大，個人認(rèn)為10%-20%可以了,，能節(jié)約處就節(jié)約點嘛,！另外，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,，放在4度冰箱預(yù)冷,。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管,。

（5）關(guān)于“慢凍",，傳統(tǒng)的方法，LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,，4度2h,，-20度2h或更長，-80度過夜,，最后液氮,。對于條件較好的實驗室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實驗室,，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇,，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,，很方便，省了包棉花,、4度,、-20度了。

Snake poison Protein/FITC 熒光素標(biāo)記抗蛇毒蛋白抗體(中華眼鏡蛇)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

CRP (C-reactive protin) C-反應(yīng)蛋白(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

成骨相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子抗體  Osx 0.1ml

PIG54 英文名稱： 細(xì)胞增殖誘導(dǎo)蛋白54抗體 0.1ml

phospho-EGFR (Tyr1110) 英文名稱： 磷酸化表皮生長因子受體抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-NMDAR2A/NR2A (Tyr1246) 磷酸化谷受體2A抗體 規(guī)格 0.1ml

CRP (C-reactive protin) C-反應(yīng)蛋白(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

TLR5/CD285 (Toll-like receptor 5) Toll樣受體5抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

 CA15-3/MUC1 癌相關(guān)抗原抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh PDLIM1 細(xì)胞骨架蛋白C端PDLIM1抗體 規(guī)格 0.2ml

Calponin鈣調(diào)節(jié)蛋白 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝

TFF3 英文名稱： 三葉肽因子3抗體 0.1ml

Phospho-CENPA (Ser7) 英文名稱： 磷酸化著絲粒蛋白A 0.1ml

 CA15-3/MUC1 癌相關(guān)抗原抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Goat  Bovine IgG/Cy3 Cy3標(biāo)記的羊抗IgG 0.1ml

FHL2 英文名稱： 相互作用蛋白FHL2抗體 0.1ml

胃泌素抑制肽抗體  GIP 0.2ml

 phospho-c-Jun (Ser243) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化原癌基因c-Jun抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-SIRT6(Ser338) 磷酸化沉默調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白6抗體 規(guī)格 0.1ml

Rabbit  chicken IgM 兔抗雞IgM (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格： 1mg
大鼠肝癌細(xì)胞 ;H4-II-E-C3/酵母細(xì)胞線粒體形態(tài)/活性熒光染色試劑盒100次流感病抗體IgG（FLU）ELISA試劑盒--動物,，人

5羥色（5-HT）ELISA試劑盒--動物,，人

純化線粒體形態(tài)/活性熒光染色試劑盒100次載脂蛋白C3（Apo C3）ELISA試劑盒--動物，人

小鼠一氧化氮（NO）ELISA試劑盒,

活體細(xì)胞線粒體跟蹤試劑盒100次小鼠可溶性CD86（B7-2/sCD86）ELISA試劑盒,

活體細(xì)胞線粒體長期跟蹤試劑盒20次兔子球蛋白G（IgG）ELISA試劑盒,

全血線粒體DNA萃取試劑盒10/20次兔子肝生長因子（HGF）ELISA試劑盒,

全血基因組/線粒體DNA同步萃取試劑盒10/20次膠原蛋白Ⅱ（HCBⅡ）ELISA試劑盒--動物,，人

純化線粒體DNA萃取試劑盒20次抗流行性出血熱病抗體IgM （EHF）ELISA試劑盒--動物,，人

純化線粒體總RNA萃取試劑盒20次抗狂犬病抗體（anti-RV）ELISA試劑盒--動物,，人

純化線粒體DNA/RNA同步萃取試劑盒20次腎上腺素（EPI）ELISA試劑盒--動物,，人

細(xì)胞/組織線粒體DNA萃取試劑盒10次BPLS瓊脂

動物硬組織線粒體DNA萃取試劑盒10次Candida Elective 瓊脂

細(xì)胞/組織基因組/線粒體DNA同步萃取試劑盒10/20次L-賴醋酸

動物血小板線粒體DNA萃取試劑盒10/20次小鼠乙型肝炎e抗原（HBeAg）ELISA試劑盒,

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途，選擇適宜的培養(yǎng)基,，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈,。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi)，標(biāo)記劃線,，加熱溶解,，補(bǔ)充水分，測定酸堿度,，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計測定,。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。

（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上,，再用人子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。

（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL,；三角瓶中裝100～150ml）,，塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準(zhǔn)備滅菌,。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌,，常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死,，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性,，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,，即壓力越大,，蒸汽溫度就越高,。因此，在同一溫度條件下,，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好,。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后,，其蛋白質(zhì)易于凝固變性,，因為蒸汽的穿透力強(qiáng)，殺菌效果好,。