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當(dāng)前位置:上海研生實業(yè)有限公司>>天然蛋白,、重組蛋白>>真核蛋白/EP>> N-?;拾贝减0匪饷?(ASAH2)真核蛋白
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所 在 地上海市
更新時間:2023-03-22 22:04:49瀏覽次數(shù):311次
聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)脂蛋白關(guān)聯(lián)磷脂酶A2(LpPLA2)真核蛋白
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
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主要用途 | 僅供科研實驗 | 英文名稱 | Eukaryotic N-Acylsphingosine Amidohydrolase 2 (ASA |
種屬 | Homo sapiens (Human,,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
公司產(chǎn)品僅供科研實驗產(chǎn)品屬性:
特點:
標(biāo)記:標(biāo)記反應(yīng)簡單,、溫和且很少抑制抗體活性,,將與抗體共價結(jié)合是一種非常簡便、直接的標(biāo)記方法,。
酶標(biāo)記:酶標(biāo)記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成,,其應(yīng)用范圍非常廣泛,結(jié)果即時可見,、敏感性高,。
熒光標(biāo)記:熒光基團(tuán)AbFluorTM是新型的熒光標(biāo)記物之一,產(chǎn)品覆蓋350-770nm,。不同的AbFluor基團(tuán)經(jīng)恰當(dāng)?shù)募す饪砂l(fā)光,, 從而得知抗體的定位和待測抗原的分布情況,主要用于細(xì)胞分選或高分辨率免疫染色,,是一種非常好的亞細(xì)胞水平定位的方法,。
產(chǎn)品名稱:N-酰基鞘氨醇酰胺水解酶2(ASAH2)真核蛋白
物種:Homo sapiens (Human,,人)
英文名稱:Eukaryotic N-Acylsphingosine Amidohydrolase 2 (ASAH2)
HNAC1; non-lysosomal ceramidase; Neutral ceramidase
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,,人) 來源:真核表達(dá) 宿主293F cell 內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定) 亞細(xì)胞定位::細(xì)胞膜 預(yù)測分子量:106.0kDa 實際分子量:100kDa(差異分析請參閱說明書) 片段與標(biāo)簽:Phe99~Ile780 with N-terminal His Tag and C-terminal Fc Region of Human IgG1 緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.) 性狀:凍干粉 純度:> 80% 等電點:7.2 應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
相關(guān)產(chǎn)品:
硫酸酯酶2(SULF2)重組蛋白Recombinant Pyruvate Carboxylase (PC)
硫酸酯酶1(SULF1)重組蛋白Recombinant Neuropathy Target Esterase (NTE)
硫嘌呤甲基轉(zhuǎn)移酶(TPMT)重組蛋白Recombinant Nicotinamide-N-Methyltransferase (NNMT)
硫代硫酸鹽轉(zhuǎn)硫酶(TST)重組蛋白Recombinant N-Acetylneuraminic Acid Synthase (NANS)
標(biāo)簽選擇:
親和標(biāo)簽:蛋白重組表達(dá)過程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易,;另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶,。蛋白標(biāo)簽可分兩類:一類是短肽類標(biāo)簽;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達(dá),。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來分析,。
不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,大致步驟如下:
真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:
a. 選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞(常用的CHO和HEK293)
b. 表達(dá)載體的構(gòu)建
c. 無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提
d. 細(xì)胞瞬時轉(zhuǎn)染
e. 表達(dá)小試,,條件優(yōu)化
f. 表達(dá)分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)
g. 大量表達(dá)
h. 親和純化
i. 檢測和鑒定
原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:
a. 選擇表達(dá)載體
b. 密碼子優(yōu)化
c. 基因合成/亞克隆
d. 轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株
e. 蛋白表達(dá)小試分析
f. 如果蛋白可溶,,蛋白親和純化
g. 如果蛋白不可溶,則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白,。
h. 鑒定,,包括SDS-PAGE和WB鑒定
GZMH蛋白;表達(dá)蛋白的分析,、純化,、檢測
誘導(dǎo)表達(dá)成功后,,表達(dá)蛋白的分析、純化,、檢測應(yīng)該順當(dāng),,按一般的實驗步驟做沒太大的問題。
操作步驟 :
根據(jù)使用量,,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM?;靹騻溆茫≒MSF 現(xiàn)用現(xiàn)加),。
1、樣品前處理:
a)對于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,,用 PBS,、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。用槍吹打數(shù)下,,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。
b)對于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,,用手指把細(xì)胞用力彈散,。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞,。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀,。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管,,然后再裂解,。
c)對于組織樣品: 把切成細(xì)小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解液的用量),。用玻璃勻漿器勻漿,,直至充分裂解。
2,、后處理:
將裂解后
的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測定,、SDS-PAGE,、Western blotting 和免疫沉淀等操作
MUC15產(chǎn)品名稱: 粘蛋白15抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat
應(yīng)用類型: Other英文名稱: Human Ig Kappa light chain英文別名: Kappa Light Chain; IGKC; HCAK 1; HCAK1; Ig kappa chain C region; IGKC; Immuglobulin kappa constant; Immuglobulin kappa constant region; Immuglobulin kappa light chain; Kappa 1 immuglobulin light chain; Km; MGC111575; MGC62011; MGC72072; MGC88770; MGC88771; MGC88809; Human Ig/L-Chain Kappa; IGKC_HUMAN.
ALPI產(chǎn)品名稱: 堿性磷suanmei(腸型)抗體產(chǎn)品別名: 腸道堿性磷suanmei; 腸堿性磷suanmei; 堿性磷suanmei,腸型; 腸型堿性磷suanmei;
HDX產(chǎn)品名稱: 高度發(fā)散同源異型盒蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Horse, Rabbit
ZDHHC-18產(chǎn)品名稱: 鋅指蛋白Zdhhc18抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse
NUDT17產(chǎn)品名稱: NUDT17蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Cat
phospho-MAP4K4 (Ser631)產(chǎn)品名稱: 絲裂原活化蛋白激meiMAP4K4抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Horse, Rabbit
CCDC134產(chǎn)品名稱: 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白134抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse
EML1產(chǎn)品名稱: EML1蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit
SLC35F1產(chǎn)品名稱: 溶質(zhì)載體轉(zhuǎn)運蛋白家族35成員F1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
N-酰基鞘氨醇酰胺水解酶2(ASAH2)真核蛋白大鼠載脂蛋白C-II(APOC2)ELISAAPOC2載脂蛋白C-IIelisa檢測試劑盒Rat apolipoprotein C-II,APOC2 ELISA kit
大鼠載脂蛋白C-I(APOC1)ELISA試劑盒APOC1載脂蛋白C-Ielisa kitRat apolipoprotein C-I,APOC1 ELISA kit
大鼠載脂蛋白B-48(ApoB48)ELISA試劑盒ApoB48載脂蛋白B-48ELISA試劑盒Rat apolipoprotein B-48,ApoB48 ELISA kit
大鼠載脂蛋白A1前體(Pre-Apo-A1)ELISA試劑盒Pre-Apo-A1載脂蛋白A1前體elisamei聯(lián)免疫試劑盒Rat apolipoprotein A1 precursor,Pre-Apo-A1 ELISA kit
大鼠游離甲狀腺激su(FT3)ELISA試劑盒FT3游離甲狀腺激suelisa檢測試劑盒Rat FT3 ELISA Kit
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