產(chǎn)品名稱(chēng)：腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞;A172

規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號(hào)：YS-02X9521

細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn) ：細(xì)胞生長(zhǎng)良好,，形態(tài)正常

儲(chǔ)存條件：2℃-8℃,，避光儲(chǔ)存

運(yùn)輸條件：冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞特性：

1)】組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽(yáng)性,。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV,、HCV、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌,。

5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：上皮樣，不規(guī)則細(xì)胞,，貼壁培養(yǎng),。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,；Glutamax（invitrogen 35050061），1%,；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070）,，1%；雙抗,，1%,。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

注意事項(xiàng)：

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài),，細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，細(xì)胞密度適合,，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,，過(guò)密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,，而且消化時(shí)不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過(guò)低,，10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好,，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管）,，10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個(gè)細(xì)胞）分成兩管,。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過(guò)度,，吹打不可太用力,，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,，不是加入凍存液再吹打,。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很?chē)?yán)格,，我從10%-90%都用過(guò),，問(wèn)題不大，個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛,！另外，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,，放在4度冰箱預(yù)冷,。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管,。

（5）關(guān)于“慢凍",，傳統(tǒng)的方法，LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,，4度2h,，-20度2h或更長(zhǎng)，-80度過(guò)夜,，最后液氮,。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室，推薦使用程序降溫盒,，內(nèi)裝異丙醇,，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便,，省了包棉花,、4度、-20度了,。

Tau protein/FITC 熒光素標(biāo)記微管相關(guān)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

IRS-2 胰島素受體底物-2(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

干細(xì)胞生長(zhǎng)因子抗體  SCF 0.2ml

semaphorin 3F 英文名稱(chēng)： 臂板蛋白3F抗體 0.1ml

EED 英文名稱(chēng)： 胚胎外胚層發(fā)育蛋白EED抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-MEF2D(Ser444) 磷酸化肌細(xì)胞特異性增強(qiáng)因子2D抗體 規(guī)格 0.1ml

IRS-2 胰島素受體底物-2(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Metronidazole/OVA 甲硝唑偶聯(lián)雞卵白蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 10mg

Phospho-CEBP alpha (Thr222/226) 磷酸化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP α 抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Oct-1 胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml

TMB substrate kit(3,、3、5,、5etramethylbenzidine) 四甲基聯(lián)苯胺顯色試劑盒(即用型工作液) 10ml

TRPV5 英文名稱(chēng)： 辣椒素受體5抗體 0.1ml

phospho-CTNNBIP1 (Ser36) 英文名稱(chēng)： 磷酸化β鏈接素相互作用蛋白1抗體 0.1ml

Phospho-CEBP alpha (Thr222/226) 磷酸化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP α 抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

p70 S6 kinase beta 英文名稱(chēng)： 核糖體蛋白S6激酶1抗體 0.2ml

phospho-EIF4G1 (Ser1238) 英文名稱(chēng)： 磷酸化真核翻譯起始因子4G抗體 0.1ml

神經(jīng)生長(zhǎng)因子抗體  NTN 0.1ml

Phospho-Smad1 (Ser206) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-NTRK2/TrkB (Tyr515) 磷酸化酪氨酸激酶B抗體 規(guī)格 0.1ml

Caspase-10 半胱胺酸蛋白酶-10(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞;A1723,5-二甲酰氯(>99.0%(T))香蒲新苷植物P型氫ATP酶（H＋－ATPase）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

2,4-二肼鹽酸鹽(>98.0%(HPLC)(T))紫丁香苷植物V型氫ATP酶（H＋－ATPase）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

O-4-硝基芐基羥鹽酸鹽(>99.0%(HPLC),用于高效液相色譜標(biāo)記)虎杖苷（白黎苷）植物F型氫ATP酶（H＋－ATPase）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

氮苯磺酰肼(>99.0%(HPLC),用于高效液相色譜標(biāo)記)L-谷氨酸動(dòng)物銅ATP酶（Cu＋＋ －ATPase）活性比色法量檢測(cè)試劑盒

7-乙酰氧基-4-溴甲基(>98.0%(HPLC)(T),用于高效液相色譜標(biāo))酪氨酸動(dòng)物組織銅ATP酶（Cu＋＋ －ATPase）活性比色法量檢測(cè)試劑盒

Br-Mmc (=4-溴甲基-7-甲氧基)(>98.0%(T))L-羥脯氨酸銅ATP酶（Cu＋＋ －ATPase）活性比色法量檢測(cè)試劑盒

3-溴甲基-7-甲氧基-1,4-苯并惡-2-酮(>98.0%(T))降香揮發(fā)油酵母銅ATP酶（Cu＋＋ －ATPase）活性比色法量檢測(cè)試劑盒

DBD-PZ [=4-(N,N-二甲氨基磺?；?-7-哌-2,1,3-苯并惡二唑](>98.0%(HPLC))甲基橙皮苷植物銅ATP酶（Cu＋＋ －ATPase）活性比色法量檢測(cè)試劑盒

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱(chēng)量試劑：根據(jù)不同的菌類(lèi)和用途，選擇適宜的培養(yǎng)基,，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈,。

（二）校正pH值：將稱(chēng)量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi)，標(biāo)記劃線,，加熱溶解,，補(bǔ)充水分，測(cè)定酸堿度,，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計(jì)測(cè)定,。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。

（三）過(guò)濾：將玻璃漏斗置鐵架上,，再用人子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,，將上述培養(yǎng)基倒入其中過(guò)濾至透明。

（四）分裝：將過(guò)濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶?jī)?nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL,；三角瓶中裝100～150ml）,，塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準(zhǔn)備滅菌,。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌,，常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死,，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性,，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,，即壓力越大,，蒸汽溫度就越高。因此,，在同一溫度條件下,，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,，菌體吸收水分后,，其蛋白質(zhì)易于凝固變性，因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng),，殺菌效果好,。