細胞特性：

1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織,。

2)細胞鑒定：細胞免疫熒光染色為陽性,。

3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1,、 HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌。

5)細胞生長方式：上皮樣,，不規(guī)則細胞,，貼壁培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱：乳腺導管癌細胞;BT-474

規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號：YS-02X9549

細胞生長實驗 ：細胞生長良好,，形態(tài)正常

儲存條件：2℃-8℃,，避光儲存

運輸條件：冰袋冷藏運輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1） 準備RPMI-1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,；Glutamax（invitrogen 35050061），1%,；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070）,，1%；雙抗,，1%,。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3） 凍存液：90%血清,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,。

二． 細胞處理：

1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?50px皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度,。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。

注意事項：

（1）凍存前細胞狀態(tài),，細胞最好在對數(shù)生長期,，細胞密度適合，剛剛發(fā)生細胞融合,，過密或連成片的細胞狀態(tài)不好,，而且消化時不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過低,，10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好，我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107）,，一瓶凍一管（1.5ml凍存管）,，10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個細胞）分成兩管。

（3）消化和吹打,，切忌胰酶消化過度,，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡,。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液,。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格,，我從10%-90%都用過，問題不大,，個人認為10%-20%可以了,，能節(jié)約處就節(jié)約點嘛！另外,，凍存液可以在處理細胞前配置,，放在4度冰箱預冷,。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸，移入凍存管,。

（5）關(guān)于“慢凍",，傳統(tǒng)的方法，LLC細胞凍存管用棉花包好,，4度2h,，-20度2h或更長，-80度過夜,，最后液氮,。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數(shù)量多的實驗室，推薦使用程序降溫盒,，內(nèi)裝異丙醇,，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便,，省了包棉花,、4度、-20度了,。

使用步驟：

一）準確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途,，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈,。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),，標記劃線，加熱溶解,，補充水分,，測定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計測定,。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi),。

（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用人子宮成纖維細胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明,。

（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml）,，塞好棉塞用牛皮紙包扎好,，準備滅菌。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌,，常用高壓蒸汽滅菌法,。一般微生物的營養(yǎng)細胞在水中煮沸后即被殺死，但細菌的芽胞有較強的抗熱性,，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的,。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,，即壓力越大，蒸汽溫度就越高,。因此,，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好,。而且在濕熱情況下,，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性,，因為蒸汽的穿透力強,，殺菌效果好。

Phospho-Rictor (Thr1135)/FITC 熒光素標記磷酸化雷帕霉素靶蛋白復合體2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Leupeptin 亮抑酶肽Multi-class antibodies規(guī)格： 1mg

管內(nèi)皮透明質(zhì)酸受體抗體  LYVE-1 0.1ml

SERTAD2 英文名稱： 調(diào)控周期蛋白依賴蛋白激酶SEI2抗體 0.2ml

FRMD1 英文名稱： FRMD1蛋白抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-PKC delta (Tyr311) 磷酸化蛋白激酶C亞性D型抗體 規(guī)格 0.1ml

Leupeptin 亮抑酶肽Multi-class antibodies規(guī)格： 1mg

TGF Beta 2 人轉(zhuǎn)化生長因子 β 2Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 Contactin-6 NB-3神經(jīng)粘附蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Noggin 指(趾)關(guān)節(jié)粘連NOG蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml

Human beta2 glycoprotein, Beta2-GP ELISA Kit 人β2糖蛋白 96T

TSH 英文名稱： 促甲狀腺素抗體 0.1ml

C1orf109 英文名稱： 1號染色體開放閱讀框109抗體 0.2ml

 Contactin-6 NB-3神經(jīng)粘附蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

SRRM1 英文名稱： 絲酸/精酸相關(guān)核基質(zhì)蛋白1抗體 0.2ml

phospho-EGFR (Ser768) 英文名稱： 磷酸化表皮生長因子受體抗體 0.1ml

骨保護蛋白/護骨素抗體  OPG 0.1ml

 Phospho-SMC1 (Ser957)/FITC 熒光素標記磷酸化染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白質(zhì)1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-NMDAR2B (Tyr1252) 磷酸化谷氨酸受體2B抗體 規(guī)格 0.1ml

ChAT(Choline Acetyltransferase) 膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
乳腺導管癌細胞;BT-4746,7-亞甲二氧基-4-甲基-3-馬來酰亞(>98.0%(HPLC)(N))α-松油（暫行）組織短鏈羥脂酰A脫氫酶（HYDROXYACYL COA DEHYDROGENASE）活性比色法定量檢測試劑盒

4-甲基-6,7-亞甲基二氧代(>99.0 %(GC))楊梅苷組織中鏈羥脂酰A脫氫酶（HYDROXYACYL COA DEHYDROGENASE）活性比色法定量檢測試劑盒

7-甲氧基-3-羧酸(>98.0%(GC)(T))竹節(jié)參皂苷ⅠVa  （暫行）組織長鏈羥脂酰A脫氫酶（HYDROXYACYL COA DEHYDROGENASE）活性比色法定量檢測試劑盒

氯化頻哪(>90.0%(HPLC))三百草酮短鏈酮脂酰A硫解酶（KETOACYL COA THIOLASE）活性比色法定量檢測試劑盒

化頻哪(>90.0%(HPLC))櫟癭酸中鏈酮脂酰A硫解酶（KETOACYL COA THIOLASE）活性比色法定量檢測試劑盒

溶劑綠 7(>85.0%(E))馬錢苷酸長鏈酮脂酰A硫解酶（KETOACYL COA THIOLASE）活性比色法定量檢測試劑盒

磺酰熒光素(>75.0%(HPLC)(T))大戟二烯組織短鏈酮脂酰A硫解酶（KETOACYL COA THIOLASE）活性比色法定量檢測試劑盒

N-琥珀酰亞基-7-羥基-3-羧酸酯(>95.0%(HPLC)(T))長梗冬青苷組織中鏈酮脂酰A硫解酶（KETOACYL COA THIOLASE）活性比色法定量檢測試劑盒