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人牙齦成纖維細(xì)胞使用說明書

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌ATCC

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2017-01-10 15:30:55瀏覽次數(shù):461次

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資源名稱 人牙齦成纖維細(xì)胞使用說明書
種屬  Human Gingival Fibroblasts

分離基物  正常人牙齦組織

提供形式  P1-2代凍存管

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基  45%DMEM+45%F12+10%FBS

傳代方法  該細(xì)胞為原代細(xì)胞,,建議1傳2

生長條件  95%空氣+5%二氧化碳 37攝氏度

存儲(chǔ)條件  50%*培養(yǎng)基+40%FBS+10%DMSO 液氮

冷凍保存方法一:冷凍管置于4300分鐘→(-2030分鐘*)→-8016~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽長期儲(chǔ)存,。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲(chǔ)存,。-20℃不可超過1小時(shí),,以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,,但存活率稍微降低一些。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),,吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,,加入適量胰酶,,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,,每隔2~3min顯微鏡下觀察,,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,,加入新鮮培養(yǎng)基,,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況,。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),,1000rpm離心5min,棄去上清,,加入新鮮的培養(yǎng)基,,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),。
注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時(shí)和我們,。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,,如細(xì)胞形態(tài),、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,。
3. 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng),,隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁,,若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺(tái)盼藍(lán)染色測定細(xì)胞活力,,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng),;如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力,,請拍下照片及時(shí)和我們,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次,。
4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,,細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,,記錄細(xì)胞狀態(tài),,便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細(xì)胞只能用于科研,,不得用于臨床應(yīng)用,。
大鼠腎系膜細(xì)胞;RMC

人胚腎細(xì)胞;293 [HEK-293]

DUSP3 Others Human 人 DUSP3 / VHR 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解 (陽性對照) (變性)

Mv.1.Lu細(xì)胞,貂肺上皮細(xì)胞 人結(jié)腸癌細(xì)胞,CW-2細(xì)胞 CM-H093人顱蓋造骨細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

狗間充質(zhì)干細(xì)胞-脂肪DMSC-ad

HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/Brevig Mission/1/1918) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解 (陽性對照) (變性)

間充質(zhì)干細(xì)胞生長添加物-無血清MSCGS-2

NRXN3 Others Human 人 NRXN3 / Neurexin-3-beta 人細(xì)胞裂解 (陽性對照) (變性)

COS-1 非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞

CL-0022AGS(人胃腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

SF9, 昆蟲卵巢細(xì)胞

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KM9402 人大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

IL5RA Others Mouse 小鼠 IL5Ra / CD125 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解 (陽性對照) (變性)

大耳山羊皮膚細(xì)胞;LDG-3

前脂肪細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

興國鯉尾鰭細(xì)胞;XGL 人結(jié)腸癌細(xì)胞,,SW480[SW-480]細(xì)胞 Tca-8113(舌鱗癌細(xì)胞)

人組織細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞;U937 [U-937]

CLEC7A Others Mouse 小鼠 CLEC7A / Dectin-1 / CLECSF12 人細(xì)胞裂解 (陽性對照) (變性)

大耳山羊皮膚細(xì)胞;LDG-3

IL5RA Others Mouse 小鼠 IL5Ra / CD125 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解 (陽性對照) (變性)

前脂肪細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

興國鯉尾鰭細(xì)胞;XGL 人結(jié)腸癌細(xì)胞,,SW480[SW-480]細(xì)胞 Tca-8113(舌鱗癌細(xì)胞)

人組織細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞;U937 [U-937]

CLEC7A Others Mouse 小鼠 CLEC7A / Dectin-1 / CLECSF12 人細(xì)胞裂解 (陽性對照) (變性)

Anti-PLGF/FITC 熒光素標(biāo)記胎盤生長因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Anthrax 炭疽沉淀素血清(馬來源)Multi-class antibodies規(guī)格: 1ml

熱休克蛋白-27抗體 Anti-HSP-27 0.1ml

Rabbit Anti-rat IgM 兔抗大鼠IgM 1mg

Fibulin 5 英文名稱: 衰老關(guān)鍵蛋白抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-Rb/p105-Rb(Ser780) 磷酸化成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤抑癌蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

Anthrax 炭疽沉淀素血清(馬來源)Multi-class antibodies規(guī)格: 1ml

EPI ELISA Kit 大鼠腎上腺素Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-UCP-1 線粒體脫偶連蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh GCN2 蛋白激酶GCN2蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml

Bid ELISA Kit 大鼠BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白 96T

NALP2 英文名稱: 富含亮酸重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體 0.1ml

APBB1 interacting protein 1 英文名稱: β淀粉樣蛋白前體結(jié)合蛋白B-1抗體 0.2ml

Anti-UCP-1 線粒體脫偶連蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

GABRA1(gamma-aminobutyric acid (GABA) A receptor, alpha 1) γ1氨基丁酸A型受體α1抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

CDH2 N-Cadherin / CD325 / CDH2 兔單抗 (PE) Human

Rhesus antibody Rh phospho-DES (Thr16) 磷酸化結(jié)蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

PVDF膜(15×13.5cm 0.45um) 1張 Millipore

ZIC5 英文名稱: 鋅指蛋白ZIC5抗體 0.2ml

DNASE1L1 英文名稱: DNA酶1樣蛋白1抗體 0.2m

CDH2 N-Cadherin / CD325 / CDH2 兔單抗 (PE) Human

Donkey Anti-Guinea pig IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的驢抗豚鼠IgG 0.1ml

FBXO42 英文名稱: FBXO42蛋白抗體 0.2ml

內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Aβ相關(guān)結(jié)合蛋白抗體 Anti-ERAB 0.2ml

Anti-pEGFR(pTyr1068)/FITC 熒光素標(biāo)記抗磷酸化表皮生長因子受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-Tau protein(Ser404) 磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

Goat Anti-human C3/Gold 金標(biāo)記羊抗人IgC3(10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格: 2ml

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