細(xì)胞特性：

1)】組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織,。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽(yáng)性,。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1,、 HBV、HCV、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌,。

5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：上皮樣,，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng),。
產(chǎn)品名稱：犬巨噬細(xì)胞;DH82

規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號(hào)：YS-02X9582

細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn) ：細(xì)胞生長(zhǎng)良好,，形態(tài)正常

儲(chǔ)存條件：2℃-8℃，避光儲(chǔ)存

運(yùn)輸條件：冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%；Glutamax（invitrogen 35050061）,，1%,；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%,；雙抗,，1%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過(guò)夜）,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

注意事項(xiàng)：

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài),，細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，細(xì)胞密度適合,，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,，過(guò)密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好，而且消化時(shí)不容易分散,；

（2）凍存的密度不宜過(guò)低,，10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107）,，一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管）,，10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個(gè)細(xì)胞）分成兩管。

（3）消化和吹打,，切忌胰酶消化過(guò)度,，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡,。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液,。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格,，我從10%-90%都用過(guò)，問(wèn)題不大,，個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛！另外,，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,，放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,，移入凍存管。

（5）關(guān)于“慢凍",，傳統(tǒng)的方法,，LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好，4度2h,，-20度2h或更長(zhǎng),，-80度過(guò)夜，最后液氮,。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇,，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,，很方便,，省了包棉花、4度,、-20度了,。

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途，選擇適宜的培養(yǎng)基,，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈,。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi)，標(biāo)記劃線,，加熱溶解,，補(bǔ)充水分，測(cè)定酸堿度,，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計(jì)測(cè)定,。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。

（三）過(guò)濾：將玻璃漏斗置鐵架上,，再用人子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,，將上述培養(yǎng)基倒入其中過(guò)濾至透明。

（四）分裝：將過(guò)濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶?jī)?nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL,；三角瓶中裝100～150ml）,，塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準(zhǔn)備滅菌,。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌,，常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死,，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性,，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,，即壓力越大,，蒸汽溫度就越高。因此,，在同一溫度條件下,，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,，菌體吸收水分后,，其蛋白質(zhì)易于凝固變性，因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng),，殺菌效果好,。

P73 protein/FITC 熒光素標(biāo)記P73抑制基因抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rabbit  human IgG/Biotin 生物素化兔抗人IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

CULLIN抗體  CULLIN/Cdc53/CUL/SCFCdc4 0.2ml

Rabbit  mouse IgM/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的兔抗小鼠IgM 0.1ml

phospho-Filamin A (Ser1458) 英文名稱： 磷酸化細(xì)絲蛋白A抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Wee1(Ser642) 磷酸化WEE1蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

Rabbit  human IgG/Biotin 生物素化兔抗人IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

integrin Beta1(ITG- Beta1/CD29) 粘附分子整合素β1抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

 ADRA2 ADRA2腎上腺素能受體2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-CD19(Ser227) 磷酸化CD19抗體 規(guī)格 0.1ml

TMB雙組分A+B液 AB液各500ml 用于ELISA

VGLL2 英文名稱： 轉(zhuǎn)錄輔助因子退變樣蛋白2抗體 0.2ml

Dnmt2 英文名稱： DNA甲基轉(zhuǎn)移酶2抗體 0.2ml

 ADRA2 ADRA2腎上腺素能受體2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

SCG10 英文名稱： 神經(jīng)生長(zhǎng)相關(guān)蛋白SCG10抗體 0.1ml

EDA 英文名稱： 外胚層發(fā)育蛋白1抗體 0.2ml

X-連鎖凋亡蛋白/性連鎖凋亡抑制蛋白抗體  XIAP 0.2ml

 TSLC1/FITC 熒光素標(biāo)記肺癌阻抑基因1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-IKK beta(Ser466) 磷酸化KB抑制蛋白激酶β抗體 規(guī)格 0.1ml

TrK A.B.C 神經(jīng)生長(zhǎng)因子的一種(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
犬巨噬細(xì)胞;DH82α,α-二苯基-4-甲藁本（藁本）果蠅萃取物制備試劑盒

葡萄糖氧化酶藁本（遼藁本）果蠅直接法PCR擴(kuò)增試劑盒

溶菌酶(蛋清)薤白(小根蒜）果蠅甲磺酸乙脂突變誘導(dǎo)試劑盒

HRP;辣根過(guò)氧化物酶鶴虱β－半乳糖苷酶活性原位染色試劑盒

透明質(zhì)酸酶■蟾酥β-半乳糖苷酶活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒

抑肽酶(來(lái)源于牛肺,胰蛋白酶抑制劑)松葉β-半乳糖苷酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

E-64,蛋白酶抑制劑人參蘆頭革蘭氏陽(yáng)性基因組DNA純化試劑盒

阿齊沙坦酯廣藿香鏈霉菌屬基因組DNA純化試劑盒