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品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)經(jīng)銷(xiāo)商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2023-03-22 20:27:03瀏覽次數(shù):267次
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主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱(chēng) | Recombinant Sphingomyelin Phosphodiesterase 4 (SMP |
種屬 | Homo sapiens (Human,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
公司產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品屬性:
特點(diǎn):
標(biāo)記:標(biāo)記反應(yīng)簡(jiǎn)單,、溫和且很少抑制抗體活性,,將與抗體共價(jià)結(jié)合是一種非常簡(jiǎn)便、直接的標(biāo)記方法,。
酶標(biāo)記:酶標(biāo)記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成,,其應(yīng)用范圍非常廣泛,結(jié)果即時(shí)可見(jiàn),、敏感性高,。
熒光標(biāo)記:熒光基團(tuán)AbFluorTM是新型的熒光標(biāo)記物之一,產(chǎn)品覆蓋350-770nm,。不同的AbFluor基團(tuán)經(jīng)恰當(dāng)?shù)募す饪砂l(fā)光,, 從而得知抗體的定位和待測(cè)抗原的分布情況,主要用于細(xì)胞分選或高分辨率免疫染色,,是一種非常好的亞細(xì)胞水平定位的方法,。
產(chǎn)品名稱(chēng):鞘磷脂磷酸二酯酶4(SMPD4)重組蛋白
物種:Homo sapiens (Human,人)
英文名稱(chēng):Recombinant Sphingomyelin Phosphodiesterase 4 (SMPD4)
NSMASE3; NET13; Neutral Sphingomyelinase-3
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,,人) 來(lái)源:原核表達(dá) 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定) 亞細(xì)胞定位::分泌 預(yù)測(cè)分子量:19.1kDa 實(shí)際分子量:19kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū)) 片段與標(biāo)簽:Ala10~His148 with N-terminal His Tag 緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300) 性狀:凍干粉 純度:> 97% 等電點(diǎn):7.2 應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
相關(guān)產(chǎn)品:
周期素依賴性激酶9(CDK9)重組蛋白英文名稱(chēng):Recombinant Cyclin Dependent Kinase 9 (CDK9)Homo sapiens (Human,,人)
周期素依賴性激酶抑制因子3(CDKN3)重組蛋白英文名稱(chēng):Recombinant Cyclin Dependent Kinase Inhibitor 3 (CDKN3)Homo sapiens (Human,人)
轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白(PALB)重組蛋白英文名稱(chēng):Recombinant Prealbumin (PALB)Bos taurus; Bovine (Cattle,牛)
轉(zhuǎn)醛縮酶(TALDO1)重組蛋白英文名稱(chēng):Recombinant Transaldolase (TALDO1)Homo sapiens (Human,,人)
標(biāo)簽選擇:
親和標(biāo)簽:蛋白重組表達(dá)過(guò)程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過(guò)程變得更加容易,;另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶。蛋白標(biāo)簽可分兩類(lèi):一類(lèi)是短肽類(lèi)標(biāo)簽,;一類(lèi)是長(zhǎng)肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達(dá),。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來(lái)分析。
不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,,大致步驟如下:
真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:
a. 選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞(常用的CHO和HEK293)
b. 表達(dá)載體的構(gòu)建
c. 無(wú)內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提
d. 細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染
e. 表達(dá)小試,,條件優(yōu)化
f. 表達(dá)分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)
g. 大量表達(dá)
h. 親和純化
i. 檢測(cè)和鑒定
原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:
a. 選擇表達(dá)載體
b. 密碼子優(yōu)化
c. 基因合成/亞克隆
d. 轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株
e. 蛋白表達(dá)小試分析
f. 如果蛋白可溶,蛋白親和純化
g. 如果蛋白不可溶,,則需要變復(fù)性來(lái)制備可溶蛋白,。
h. 鑒定,包括SDS-PAGE和WB鑒定
GZMH蛋白,;表達(dá)蛋白的分析,、純化、檢測(cè)
誘導(dǎo)表達(dá)成功后,,表達(dá)蛋白的分析,、純化、檢測(cè)應(yīng)該順當(dāng),,按一般的實(shí)驗(yàn)步驟做沒(méi)太大的問(wèn)題,。
操作步驟 :
根據(jù)使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM,。混勻備用(PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加),。
1,、樣品前處理:
a)對(duì)于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS,、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍,。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,,使裂解液和細(xì)胞充分接觸,。
b)對(duì)于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散,。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,,再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒(méi)有明顯的細(xì)胞沉淀,。如果細(xì)胞量較多,,必需分裝成 50-100 萬(wàn)細(xì)胞/管,,然后再裂解。
c)對(duì)于組織樣品: 把切成細(xì)小的碎片,。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,,可以適當(dāng)減少裂解液的用量),。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解,。
2,、后處理:
將裂解后
的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,,即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測(cè)定,、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作
Mafa產(chǎn)品名稱(chēng): v-maf 肌腱膜纖維肉基因同源物A抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Cow
CD66c產(chǎn)品名稱(chēng): 胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子抗體交叉反應(yīng): Human
MOGT1產(chǎn)品名稱(chēng): MOGT1蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Rabbit
MPXV A29產(chǎn)品名稱(chēng): 猴痘毒A29單克隆抗體標(biāo)記: Unconjugated
Adesine A3 Receptor產(chǎn)品名稱(chēng): 苷受體A3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat
SPAG11A產(chǎn)品名稱(chēng): 相關(guān)抗原11A抗體交叉反應(yīng): Human, Monkey
MYLK3產(chǎn)品名稱(chēng): 肌球蛋白輕鏈激mei3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
RANK產(chǎn)品名稱(chēng): 核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB受體/核因子kB受體活化因子抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rabbit, Sheep
KIR2DS3產(chǎn)品名稱(chēng): NK細(xì)胞性受體2DS3抗體交叉反應(yīng): Human
SLC4A4 variant A產(chǎn)品名稱(chēng): 碳suan氫鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4-A4突變型抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat
鞘磷脂磷酸二酯酶4(SMPD4)重組蛋白人Leupaxin蛋白(LPXN)ELISA試劑盒LPXNLeupaxin蛋白ELISA試劑盒Human Leupaxin(LPXN)ELISA Kit
人Lengsin蛋白(LGSN)ELISA試劑盒LGSNLengsin蛋白elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Lengsin(LGSN)ELISA Kit
人Lebercilin蛋白(LCA5)ELISA試劑盒LCA5Lebercilin蛋白elisa檢測(cè)試劑盒Human Lebercilin(LCA5)ELISA Kit
人Laforin蛋白(LDE)ELISA試劑盒LDELaforin蛋白elisa kitHuman Laforin(LDE)ELISA Kit
人Ladinin人1蛋白(LAD1)ELISA試劑盒LAD1Ladinin1蛋白ELISA試劑盒Human Ladinin 1(LAD1)ELISA Kit
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