細胞特性：

1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織,。

2)細胞鑒定：細胞免疫熒光染色為陽性,。

3)經鑒定細胞純度高于90%,。

4)不含有 HIV-1、 HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌,。

5)細胞生長方式：上皮樣，不規(guī)則細胞,，貼壁培養(yǎng),。
產品名稱：腎癌Wilms細胞;G-401

規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號：YS-02X9845

細胞生長實驗 ：細胞生長良好，形態(tài)正常

儲存條件：2℃-8℃,，避光儲存

運輸條件：冰袋冷藏運輸
公司產品僅用于科研

細胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1） 準備RPMI-1640 培養(yǎng)基,；優(yōu)質胎牛血清，10%,；Glutamax（invitrogen 35050061）,，1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070）,，1%,；雙抗，1%,。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3） 凍存液：90%血清,，10%DMSO，現用現配,。

二． 細胞處理：

1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入250px皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。

注意事項：

（1）凍存前細胞狀態(tài)，細胞最好在對數生長期,，細胞密度適合,，剛剛發(fā)生細胞融合，過密或連成片的細胞狀態(tài)不好,，而且消化時不容易分散,；

（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數量級比較好,，我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107）,，一瓶凍一管（1.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個細胞）分成兩管,。

（3）消化和吹打,，切忌胰酶消化過度，吹打不可太用力,，最好不要吹出好多泡泡,。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打,。

（4）離心后加入凍存液,。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格，我從10%-90%都用過,，問題不大,，個人認為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點嘛,！另外,，凍存液可以在處理細胞前配置，放在4度冰箱預冷,。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸,，移入凍存管。

（5）關于“慢凍",，傳統(tǒng)的方法,，LLC細胞凍存管用棉花包好，4度2h,，-20度2h或更長,，-80度過夜，最后液氮,。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數量多的實驗室,，推薦使用程序降溫盒,，內裝異丙醇，在-80度并內可以逐漸降溫,，很方便,，省了包棉花、4度,、-20度了。

使用步驟：

一）準確稱量試劑：根據不同的菌類和用途,，選擇適宜的培養(yǎng)基,，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內,，標記劃線,，加熱溶解，補充水分,，測定酸堿度,，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH和1N HCl調節(jié)pH值到適宜范圍內,。

（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上,，再用人子宮成纖維細胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明,。

（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內（試管內每支裝5mL,；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好,，準備滅菌,。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法,。一般微生物的營養(yǎng)細胞在水中煮沸后即被殺死,，但細菌的芽胞有較強的抗熱性，須經高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的,。根據蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,，即壓力越大，蒸汽溫度就越高,。因此,，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好,。而且在濕熱情況下,，菌體吸收水分后，其蛋白質易于凝固變性,，因為蒸汽的穿透力強,，殺菌效果好,。

CD99/E2 antigen/FITC 熒光素標記CD99抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

CTBP1(C-terminal binding protein 1) C端結合蛋白1抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

芳香烴受體抗體  AHR 0.1ml

ZNF239 英文名稱： 鋅指蛋白239抗體 0.2ml

DP1 英文名稱： 轉錄因子DP1抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-FAK(Tyr925) 磷酸化粘著斑激酶抗體 規(guī)格 0.1ml

CTBP1(C-terminal binding protein 1) C端結合蛋白1抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

CXorf36(uncharacterized protein Cxorf36 precursor) 脫羧酶蛋白體36 cxorf36抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

 CCR5 細胞表面趨化因子受體5抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PBEF1(CT) 內脂素/內臟脂肪素(C端抗體) 規(guī)格 0.1ml

LILRB3 Kit Human 人 LILRB3 ELISA配對抗體 ELISA

TG 英文名稱： 兔抗甲狀腺球蛋白 0.1ml

CXorf36 英文名稱： 脫羧酶蛋白體36抗體 0.2ml

 CCR5 細胞表面趨化因子受體5抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rabbit  Bov IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的兔抗IgG 0.1ml

FOLR2 英文名稱： 胎盤酸受體蛋白2抗體 0.1ml

胰高血糖素樣肽-1抗體  GLP-1 0.1ml

 phospho Histone H1,4(pSer27)/FITC 熒光素標記抗磷酸化組蛋白H1,4樣蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-SHP2/SHIP2(Tyr477) 磷酸化蛋白酪磷酸酶2抗體 規(guī)格 0.1ml

Rabbit  Goat IgM 兔抗羊IgM (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格： 1mg
腎癌Wilms細胞;G-401聚乙二醇細胞融合試劑盒10次小鼠α2纖溶酶抑制物（α2-PI）ELISA試劑盒,

電擊法細胞融合試劑盒10次小鼠甲狀腺素抗體（TAb）ELISA試劑盒,

甲基纖維素細胞克隆試劑盒10/50/80次小鼠促性腺素釋放素（GnRH）ELISA試劑盒,

軟瓊脂細胞克隆試劑盒10/20次α-內肽（α-EP）ELISA試劑盒--動物，人

藍色熒光染色體核型分析試劑盒100次胰腺癌標志物CA242ELISA試劑盒--動物,，人

熒光細胞流式儀分析試劑盒10次生長素釋放多肽（GHRP） ELISA試劑盒--動物,，人

線粒體試劑專題人肽釋放酶11（KLK 11）ELISA試劑盒, KLK 11 ELISA kit

名稱規(guī)格小鼠基質衍生因子1a（SDF-1a/CXCL12）ELISA試劑盒,

純化線粒體內膜功能/膜電位紅色熒光（TMRM）測定試劑盒100次小鼠髓過氧化物酶特異性抗中性粒胞質抗體IgG（MPO-ANCA IgG）ELISA試劑盒,

活體細胞線粒體內膜功能/膜電位紅色熒光（TMRM）測定試劑盒20次小鼠T活化連接蛋白（LAT）ELISA試劑盒,

*線粒體內膜功能/膜電位紅色熒光（TMRM）測定試劑盒20次小鼠狀腺原（T3）ELISA試劑盒,

活體組織線粒體內膜功能/膜電位紅色熒光（TMRM）測定試劑盒10次腺病抗原（ADV-Ag）ELISA試劑盒--動物，人

/酵母細胞線粒體內膜功能/膜電位紅色熒光（TMRM）測定試劑盒20次3,5-二溴-L-酪

凍切片線粒體內膜功能/膜電位紅色熒光（TMRM）測定試劑盒20次L-脯芐酯鹽酸鹽

純化線粒體內膜功能/膜電位紅色熒光（TMRE）測定試劑盒100次人丙（LPA）ELISA試劑盒,