產(chǎn)品名稱：大鼠血管平滑肌細胞;USMC

規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號：YS-02X9970

細胞生長實驗 ：細胞生長良好，形態(tài)正常

儲存條件：2℃-8℃,，避光儲存

運輸條件：冰袋冷藏運輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1） 準備RPMI-1640 培養(yǎng)基,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%,；Glutamax（invitrogen 35050061）,，1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070）,，1%,；雙抗，1%,。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3） 凍存液：90%血清,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,。

二． 細胞處理：

1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?50px皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并檢查細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。

注意事項：

（1）凍存前細胞狀態(tài)，細胞最好在對數(shù)生長期,，細胞密度適合,，剛剛發(fā)生細胞融合，過密或連成片的細胞狀態(tài)不好,，而且消化時不容易分散,；

（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,，我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107）,，一瓶凍一管（1.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個細胞）分成兩管,。

（3）消化和吹打,，切忌胰酶消化過度，吹打不可太用力,，最好不要吹出好多泡泡,。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打,。

（4）離心后加入凍存液,。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格，我從10%-90%都用過,，問題不大，個人認為10%-20%可以了,，能節(jié)約處就節(jié)約點嘛,！另外，凍存液可以在處理細胞前配置,，放在4度冰箱預冷,。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸，移入凍存管,。

（5）關于“慢凍",，傳統(tǒng)的方法，LLC細胞凍存管用棉花包好,，4度2h,，-20度2h或更長，-80度過夜,，最后液氮,。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數(shù)量多的實驗室,，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇,，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,，很方便，省了包棉花,、4度,、-20度了。

使用步驟：

一）準確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途,，選擇適宜的培養(yǎng)基,，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),，標記劃線,，加熱溶解，補充水分,，測定酸堿度,，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi),。

（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上,，再用人子宮成纖維細胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明,。

（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL,；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好,，準備滅菌,。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法,。一般微生物的營養(yǎng)細胞在水中煮沸后即被殺死,，但細菌的芽胞有較強的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的,。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,，即壓力越大，蒸汽溫度就越高,。因此,，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好,。而且在濕熱情況下,，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性,，因為蒸汽的穿透力強,，殺菌效果好,。

細胞特性：

1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織。

2)細胞鑒定：細胞免疫熒光染色為陽性,。

3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%,。

4)不含有 HIV-1、 HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌,。

5)細胞生長方式：上皮樣，不規(guī)則細胞,，貼壁培養(yǎng),。
TNK1/FITC 熒光素標記非受體型酪蛋白激酶Tnk1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

CCL4/MIP-1 Beta(Macrophage Inflammatory Protein 1 beta) 巨噬細胞炎性蛋白1β抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

碳酸酐酶2抗體  CA Ⅱ 0.1ml

SEMA4B 英文名稱： 跨膜蛋白SEMA4B抗體 0.2ml

E2F1 英文名稱： 轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-HSF1(Ser307) 磷酸化熱休克因子1抗體 規(guī)格 0.1ml

CCL4/MIP-1 Beta(Macrophage Inflammatory Protein 1 beta) 巨噬細胞炎性蛋白1β抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

rat-VEGF/ELISA 大鼠血管內(nèi)皮生長因子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 DPV(Duck plague virus) 鴨瘟病毒DPV抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh NARG2 谷受體調(diào)節(jié)蛋白2抗體 規(guī)格 0.2ml

Human leucocyte antigen B27,HLA-B27 ELISA Kit 人類白細胞抗原B27 96T

SYT6 英文名稱： 突觸蛋白6抗體 0.1ml

CK18 英文名稱： 細胞角蛋白18抗體 0.1ml

 DPV(Duck plague virus) 鴨瘟病毒DPV抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rabbit  MK IgM/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的兔抗猴IgM 0.1ml

FGF11 英文名稱： 成纖維細胞生長因子11抗體 0.2ml

色素 C抗體  Cytochrome C 0.1ml

 PAR-2/FITC 熒光素標記蛋白酶激活受體-2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Tuberin/TSC2(Ser1798) 磷酸化結節(jié)性硬化蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

Goat  chi IgM/FITC 熒光素標記羊抗雞IgMMulti-class antibodies規(guī)格： 0.3ml
大鼠血管平滑肌細胞;USMC鈣ATP酶PMCA蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒25次杜鵑素  Farrerol

細胞鈣ATP酶SERCA蛋白表達流式細胞儀檢測試劑盒10/20次DL-高胱

載玻片細胞鈣ATP酶SERCA蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次還原Ⅱ鈉鹽

凍切片組織鈣ATP酶SERCA蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次5-胞苷三磷酸鈉鹽溶液

石蠟切片組織鈣ATP酶SERCA蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次DL-

載玻片細胞鈣ATP酶SERCA蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20次人丁型肝炎IgG（HDV IgG）ELISA試劑盒,HDV IgG ELISA

凍切片組織鈣ATP酶SERCA蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20次人抗腎小球基底膜抗體（GBM）ELISA試劑盒,

石蠟切片組織鈣ATP酶SERCA蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20次人胸腺肽α1（Thymosin α1）ELISA試劑盒,

細胞鈣ATP酶SERCA蛋白表達比色法定量檢測試劑盒10/50 次人蛋白C（Protein C）ELISA試劑盒,

細胞鈣ATP酶SERCA蛋白表達熒光定量檢測試劑盒10/50 次小鼠FMS樣酪酶3（Flt3）ELISA試劑盒,

鈣ATP酶SERCA蛋白表達西方雜交分析試劑盒5次小鼠超氧化物歧化酶（SOD）ELISA試劑盒,

鈣ATP酶SERCA蛋白共沉淀分析試劑盒5次大鼠乙醛脫氫酶（ALDH）ELISA試劑盒,

鈣ATP酶SERCA蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒25次大鼠熱休克蛋白40（HSP-40）ELISA試劑盒,

細胞鈣鈉交換體（NCX）蛋白表達流式細胞儀檢測試劑盒10/20次豚鼠白介素4（IL-4）ELISA試劑盒,

載玻片細胞鈣鈉交換體（NCX）蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次猴透明質(zhì)酸（HA）ELISA試劑盒,