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資源名稱 NCI-H520使用說明書
種屬  人肺鱗癌細胞

形態(tài)  上皮樣

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基  RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

傳代方法  1:3~1:6傳代,；2~3天換液1次,。

生長特性  貼壁生長

存儲條件  基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

詳細說明

傳代情況  C6

支原體檢測  培養(yǎng)法（-）

染色體  91~95

使用權限  A類

描述  1982年GazdarAF等建系，源于鱗狀細胞肺癌組織,；該細胞p53mRNA表達水平較正常肺組織低,，但是沒有大的結構DNA的異常。角蛋白,、波形蛋白陽性,，神經絲三聯蛋白陰性；該細胞在軟瓊脂中可形成克隆,。

冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽長期儲存,。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存,。-20℃不可超過1小時,，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,，但存活率稍微降低一些,。
NCI-H520使用說明書操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞,，加入適量胰酶,，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育,，每隔2~3min顯微鏡下觀察,，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,，加入新鮮培養(yǎng)基,，晃動細胞瓶，終止胰酶作用,，用吸管小心吹打貼壁的細胞,，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況,。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內,，1000rpm離心5min，棄去上清,，加入新鮮的培養(yǎng)基,，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液,，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng),。
NCI-H520使用說明書注意事項：
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現象,，若有上述現象發(fā)生請及時和我們,。
2. 仔細閱讀細胞說明書,，了解細胞相關信息，如細胞形態(tài),、所用培養(yǎng)基,、血清比例、所需細胞因子等,。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,，將細胞置于培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng),，隔天再取出觀察。此時多數細胞均會貼壁,，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力,，如果證實細胞活力正常，請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng),；如果染色結果顯示細胞無活力，請拍下照片及時和我們,，信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次,。
4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內多余的培養(yǎng)基可收集備用,，細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,，使細胞逐漸適應培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,，記錄細胞狀態(tài),，便于和公司技術部溝通交流。
6. 該細胞只能用于科研,，不得用于臨床應用,。
Anti-ECE1/FITC 熒光素標記內皮素轉化酶1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-Phospho-MK6 (Ser207)/FITC 熒光素標記磷酸化絲裂原活化蛋白激酶MKK6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh C3orf54 3號染色體開放閱讀框54抗體 規(guī)格 0.2ml

CD24 CD24抗原 0.5mg

Hemopexin 英文名稱： 糖蛋白β-1B抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh Scavenger Receptor BII 清道夫受體B2抗體 規(guī)格 0.2ml

Anti-Phospho-MK6 (Ser207)/FITC 熒光素標記磷酸化絲裂原活化蛋白激酶MKK6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-NDRG4/FITC 熒光素標記抑癌基因NDRG4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-VEGF-D/FIGF/FITC 熒光素標記兔抗人、大,、小鼠血管內皮生長因子D型VEGFD抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

血管緊張素II抗體 Anti-Ang-Ⅱ 0.1ml

Mouse Anti-human IgG/Cy5.5 Cy5.5標記的小鼠抗人IgG 0.1ml

GCP3 英文名稱： γ-微管蛋白復合物GCP3抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Profilin 1 前纖維蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml

Anti-VEGF-D/FIGF/FITC 熒光素標記兔抗人,、大、小鼠血管內皮生長因子D型VEGFD抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Mouse Anti-Goat IgG/Cy7 Cy7標記的小鼠抗羊IgG 0.1ml

GDF10 英文名稱： 生長分化因子10抗體(TGF-β超家族10) 0.1ml

整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-7 Anti-ADAM-TS7 0.2ml

Anti-Myt1/FITC 熒光素標記髓鞘轉錄因子1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Protein Z 蛋白Z抗體 規(guī)格 0.2ml

Anti-VAMP-2/FITC 熒光素標記囊泡相關膜蛋白2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

PCDH1(Human Interleukin-2 receptor,IL-2R) ELISA Kit 人原鈣黏素1Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-FRA1/FOSL1 FRA-1蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Mouse Anti-rabbit IgG/Cy5 Cy5標記的小鼠抗兔IgG 規(guī)格 0.1ml

KS(Human keratan sulfate) ELISA Kit 人角質素 96T

SCAP 英文名稱： 固醇調節(jié)元件結合蛋白裂解激活蛋白抗體 0.2ml

CDK14 英文名稱： 周期蛋白依賴性激酶14抗體 0.2ml

Anti-FRA1/FOSL1 FRA-1蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

CL-0028AtT-20(小鼠垂體瘤細胞)5×106cells/瓶×2

OPALIN Others Human 人 OPALIN 人細胞裂解 (陽性對照) (變性)

胰酶/EDTA消化T/E

SK-OV-3細胞,，人卵巢癌細胞 大鼠皮層神經元細胞,RN-c細胞 胃粘膜上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

G1(發(fā)綠色熒光的小鼠胚胎干細胞) 5×106cells/瓶×2

HPlEpC Pellet 人胎盤上皮細胞團塊 > 1 mio.cells 人前脂肪細胞-內臟cDNAHPA-v cDNA

SHH Others Human 人 SHH / Sonic hedgehog (aa 198-462) 人細胞裂解 (陽性對照) (變性)

腸粘膜上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

大鼠前脂肪細胞*培養(yǎng)基 100mL

B16-F0小鼠色素瘤細胞 B16-F0 mouse melanoma cells DMEM+10% FBS

IFNA4 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNA4 / IFNα4 / Interferon alpha-4 蛋白 (Fc 標簽)

KATO III(人胃癌細胞) 5×106cells/瓶×2 敗毒梭菌Clostridium septicum

腸粘膜上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

SHH Others Human 人 SHH / Sonic hedgehog (aa 198-462) 人細胞裂解 (陽性對照) (變性)

大鼠前脂肪細胞*培養(yǎng)基 100mL

B16-F0小鼠色素瘤細胞 B16-F0 mouse melanoma cells DMEM+10% FBS

IFNA4 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNA4 / IFNα4 / Interferon alpha-4 蛋白 (Fc 標簽)

KATO III(人胃癌細胞) 5×106cells/瓶×2 敗毒梭菌Clostridium septicum

NCI-H520使用說明書ZR-75-30(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠B淋巴細胞雜交瘤細胞;SH2

人主動脈平滑肌細胞cDNAHASMC cDNA

IFNA4 Others Rat 大鼠 IFNA4 / IFNα4 / Interferon alpha-4 人細胞裂解 (陽性對照) (變性)

C2C12細胞,，鼠肌原細胞 H08910(卵巢癌細胞) 大鼠胰島細胞瘤細胞;INS-1

EFNB1 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (Fc 標簽)

人皮下脂肪細胞*培養(yǎng)基 100mL