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泛素樣修飾激活酶6(UBA6)重組蛋白

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更新時(shí)間:2023-03-22 20:26:15瀏覽次數(shù):231次

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供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Ubiquitin Like Modifier Activating Enz
物種 Homo sapiens (Human,,人) 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
品牌 研生
泛素樣修飾激活酶6(UBA6)重組蛋白公司正在出售的產(chǎn)品:馬腺病毒探針?lè)晒舛縋CR試劑盒Equine Adenovirus(EAdV)馬腺疫鏈球菌PCR檢測(cè)試劑盒馬隱秘桿菌PCR檢測(cè)試劑盒Arcanobacterium equiPCR馬隱秘桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒Arcanobacterium equi馬腺疫鏈球菌PCR檢測(cè)試劑盒 貓弓形蟲PCR檢測(cè)試劑盒貓冠狀病毒PCR檢測(cè)試劑盒貓衣原

公司產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱:泛素樣修飾激活酶6(UBA6)重組蛋白   

物種:Homo sapiens (Human,,人)

英文名稱:Recombinant Ubiquitin Like Modifier Activating Enzyme 6 (UBA6)

UBE1L2; MOP-4; Monocyte protein 4; Ubiquitin-Activating Enzyme E1-Like 2; Ubiquitin-activating enzyme E1-like protein 2

酶與激酶

物種:Homo sapiens (Human,,人)

來(lái)源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位::分泌

預(yù)測(cè)分子量:23.6kDa

實(shí)際分子量:24kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)

片段與標(biāo)簽:Met1~Ile181 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)

性狀:凍干粉

純度:> 90%

等電點(diǎn):5.5

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

特點(diǎn):

標(biāo)記:標(biāo)記反應(yīng)簡(jiǎn)單,、溫和且很少抑制抗體活性,將與抗體共價(jià)結(jié)合是一種非常簡(jiǎn)便,、直接的標(biāo)記方法,。

酶標(biāo)記:酶標(biāo)記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成,其應(yīng)用范圍非常廣泛,,結(jié)果即時(shí)可見,、敏感性高。

熒光標(biāo)記:熒光基團(tuán)AbFluorTM是新型的熒光標(biāo)記物之一,,產(chǎn)品覆蓋350-770nm,。不同的AbFluor基團(tuán)經(jīng)恰當(dāng)?shù)募す饪砂l(fā)光, 從而得知抗體的定位和待測(cè)抗原的分布情況,,主要用于細(xì)胞分選或高分辨率免疫染色,,是一種非常好的亞細(xì)胞水平定位的方法。

相關(guān)產(chǎn)品:
中性葡糖苷酶αAB(GaNAB)重組蛋白英文名稱:Recombinant Glucosidase Alpha, Neutral AB (GaNAB)Homo sapiens (Human,,人)

中性鞘磷脂酶(NSMASE)重組蛋白英文名稱:Recombinant Neutral Sphingomyelinase (NSMASE)Homo sapiens (Human,,人)

周期素依賴性激酶1(CDK1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Cyclin Dependent Kinase 1 (CDK1)Homo sapiens (Human,,人)

周期素依賴性激酶2(CDK2)重組蛋白英文名稱:Recombinant Cyclin Dependent Kinase 2 (CDK2)Homo sapiens (Human,,人)

圖片6.png

標(biāo)簽選擇:

親和標(biāo)簽:蛋白重組表達(dá)過(guò)程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過(guò)程變得更加容易;另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶,。蛋白標(biāo)簽可分兩類:一類是短肽類標(biāo)簽,;一類是長(zhǎng)肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達(dá)。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來(lái)分析,。

不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,,大致步驟如下:

真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:

a.      選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞(常用的CHO和HEK293)

b.      表達(dá)載體的構(gòu)建

c.      無(wú)內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提

d.      細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染

e.      表達(dá)小試,條件優(yōu)化

f.       表達(dá)分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)

g.      大量表達(dá)

h.      親和純化

i.        檢測(cè)和鑒定

原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:

a.      選擇表達(dá)載體

b.      密碼子優(yōu)化

c.      基因合成/亞克隆

d.      轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株

e.      蛋白表達(dá)小試分析

f.       如果蛋白可溶,,蛋白親和純化

g.      如果蛋白不可溶,,則需要變復(fù)性來(lái)制備可溶蛋白。

h.      鑒定,,包括SDS-PAGE和WB鑒定

GZMH蛋白,;表達(dá)蛋白的分析,、純化、檢測(cè)

  誘導(dǎo)表達(dá)成功后,,表達(dá)蛋白的分析,、純化、檢測(cè)應(yīng)該順當(dāng),,按一般的實(shí)驗(yàn)步驟做沒(méi)太大的問(wèn)題,。

Phospho-FoxO3a (Ser253)產(chǎn)品名稱: 叉頭蛋白3A抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep

Di-Methyl-Histone H3 (Lys4)交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian抗體來(lái)源: Rabbit

BCMA產(chǎn)品名稱: B淋巴細(xì)胞成熟因子(CD269)抗體交叉反應(yīng): Mouse, Rat

GLIPR1L1產(chǎn)品名稱: 膠質(zhì)發(fā)相關(guān)蛋白1抗體交叉反應(yīng): Human

Regucalcin產(chǎn)品名稱: 衰老標(biāo)記蛋白30抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit

GRB10產(chǎn)品名稱: 生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白10抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit

TNRC18產(chǎn)品名稱: TNRC18蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

phospho-Kidins220 (Ser918)產(chǎn)品名稱: 220kDa蛋白激meiD相互作用蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Cow, Rabbit, GuineaPig

LHFP產(chǎn)品名稱: LHFP蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Sheep

CCDC67產(chǎn)品名稱: 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白67抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Sheep
泛素樣修飾激活酶6(UBA6)重組蛋白Marapsin人2蛋白(MPN2)ELISA試劑盒MPN2Marapsin2蛋白elisa檢測(cè)試劑盒Human Marapsin 2(MPN2)ELISA Kit

Marapsin蛋白(MPN)ELISA試劑盒MPNMarapsin蛋白elisa kitHuman Marapsin(MPN)ELISA Kit

Malectin蛋白(MLEC)ELISA試劑盒MLECMalectin蛋白ELISA試劑盒Human Malectin(MLEC)ELISA Kit

Maestro蛋白(MRO)ELISA試劑盒MROMaestro蛋白elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Maestro(MRO)ELISA Kit

L-天冬氨suan脫氫mei(ASPDH)ELISA試劑盒ASPDHL-天冬氨suan脫氫meielisa檢測(cè)試劑盒Human L-Aspartate Dehydrogenase(ASPDH)ELISA Kit
操作步驟

根據(jù)使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM,。混勻備用(PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加),。

1,、樣品前處理:

a)對(duì)于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS,、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍,。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,,使裂解液和細(xì)胞充分接觸,。

b)對(duì)于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散,。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,,再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒(méi)有明顯的細(xì)胞沉淀,。如果細(xì)胞量較多,,必需分裝成 50-100 萬(wàn)細(xì)胞/管,然后再裂解,。

c)對(duì)于組織樣品: 把切成細(xì)小的碎片,。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,,如果需要高濃度的蛋白樣品,,可以適當(dāng)減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,,直至充分裂解,。

2、后處理:

將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,,取上清,,即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測(cè)定、SDS-PAGE,、Western blotting 和免疫沉淀等操作


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