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當(dāng)前位置:上海研生實(shí)業(yè)有限公司>>天然蛋白,、重組蛋白>>重組蛋白/RP>> 基質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP7)重組蛋白
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所 在 地上海市
更新時(shí)間:2023-03-20 21:18:46瀏覽次數(shù):388次
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主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant Matrix Metalloproteinase 7 (MMP7) |
種屬 | Bos taurus; Bovine (Cattle,,牛) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
特點(diǎn):
標(biāo)記:標(biāo)記反應(yīng)簡單,、溫和且很少抑制抗體活性,將與抗體共價(jià)結(jié)合是一種非常簡便,、直接的標(biāo)記方法,。
酶標(biāo)記:酶標(biāo)記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成,其應(yīng)用范圍非常廣泛,,結(jié)果即時(shí)可見,、敏感性高。
熒光標(biāo)記:熒光基團(tuán)AbFluorTM是新型的熒光標(biāo)記物之一,,產(chǎn)品覆蓋350-770nm,。不同的AbFluor基團(tuán)經(jīng)恰當(dāng)?shù)募す饪砂l(fā)光, 從而得知抗體的定位和待測(cè)抗原的分布情況,,主要用于細(xì)胞分選或高分辨率免疫染色,,是一種非常好的亞細(xì)胞水平定位的方法。
公司產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:基質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP7)重組蛋白
物種:Bos taurus; Bovine (Cattle,,牛)
英文名稱:Recombinant Matrix Metalloproteinase 7 (MMP7)
MPSL1; MAT; PUMP-1; Matrilysin Uterine; Matrilysin; Matrin; Pump-1 Protease; Uterine Metalloproteinase
酶與激酶
腫瘤免疫
物種:Bos taurus; Bovine (Cattle,,牛) 來源:原核表達(dá) 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定) 亞細(xì)胞定位::分泌, 細(xì)胞外基質(zhì) 預(yù)測(cè)分子量:57.0kDa 實(shí)際分子量:57kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書) 片段與標(biāo)簽:Asp29~Lys267 with N-terminal His and GST Tag 緩沖液成份:100mM NaHCO3, 500mM NaCl緩沖液(pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300) 性狀:凍干粉 純度:> 90% 等電點(diǎn):9.0 應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
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標(biāo)簽選擇:
親和標(biāo)簽:蛋白重組表達(dá)過程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易;另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶,。蛋白標(biāo)簽可分兩類:一類是短肽類標(biāo)簽,;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達(dá)。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來分析,。
不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,,大致步驟如下:
真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:
a. 選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞(常用的CHO和HEK293)
b. 表達(dá)載體的構(gòu)建
c. 無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提
d. 細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染
e. 表達(dá)小試,條件優(yōu)化
f. 表達(dá)分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)
g. 大量表達(dá)
h. 親和純化
i. 檢測(cè)和鑒定
原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:
a. 選擇表達(dá)載體
b. 密碼子優(yōu)化
c. 基因合成/亞克隆
d. 轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株
e. 蛋白表達(dá)小試分析
f. 如果蛋白可溶,蛋白親和純化
g. 如果蛋白不可溶,,則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白,。
h. 鑒定,包括SDS-PAGE和WB鑒定
GZMH蛋白,;表達(dá)蛋白的分析,、純化、檢測(cè)
誘導(dǎo)表達(dá)成功后,,表達(dá)蛋白的分析,、純化、檢測(cè)應(yīng)該順當(dāng),,按一般的實(shí)驗(yàn)步驟做沒太大的問題,。
操作步驟 :
根據(jù)使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM,?;靹騻溆茫≒MSF 現(xiàn)用現(xiàn)加),。
1、樣品前處理:
a)對(duì)于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,,用 PBS,、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍,。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,,使裂解液和細(xì)胞充分接觸,。
b)對(duì)于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散,。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,,再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀,。如果細(xì)胞量較多,,必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管,然后再裂解,。
c)對(duì)于組織樣品: 把切成細(xì)小的碎片,。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,,如果需要高濃度的蛋白樣品,,可以適當(dāng)減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,,直至充分裂解,。
2、后處理:
將裂解后
的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,,即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測(cè)定,、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作
ALDH3A1產(chǎn)品名稱: 脫氫mei家族3成員A1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Horse
Ki-67產(chǎn)品名稱: Ki67蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Rabbit
Alpha B Crystallin產(chǎn)品名稱: α晶狀體球蛋白B/αB-crystallin抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse
phospho-AKT1+AKT2+AKT3 (Tyr315+316+312)產(chǎn)品名稱: 蛋白激meiAKT1,2,3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep
GATA3產(chǎn)品名稱: GATA結(jié)合蛋白3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Horse, Rabbit
Connexin 43產(chǎn)品名稱: 間隙連接蛋白43抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow
NDRG1產(chǎn)品名稱: 分化相關(guān)基因NDRG1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat
Phospho-EIF2S1 (Ser51)產(chǎn)品名稱: 真核啟動(dòng)因子2α抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Cow
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CXCR3產(chǎn)品名稱: 細(xì)胞表面趨化因子受體3(CD183)抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse
基質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP7)重組蛋白elisa kitHuman Thymosin ELISA Kit
人胸腺非依賴性抗原(TI-Ag)ELISA試劑盒TI-Ag胸腺非依賴性抗原ELISA試劑盒Human thymus independent antigen,TI-Ag ELISA Kit
人性別決定區(qū)Y蛋白(SRY)ELISA試劑盒SRY性別決定區(qū)Y蛋白elisa檢測(cè)試劑盒Human Sex-determining region Y protein,SRY ELISA kit
人信號(hào)識(shí)別顆??贵w(SRP)ELISA試劑盒SRP信號(hào)識(shí)別顆??贵welisa kitHuman signal recognization particle antibody,SRP ELISA Kit
人信號(hào)傳導(dǎo)子及轉(zhuǎn)錄激活子6(STAT6)ELISA試劑盒STAT6信號(hào)傳導(dǎo)子及轉(zhuǎn)錄激活子6ELISA試劑盒human STAT6 ELISA Kit
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