收到細胞株后處理方法

時間：2017-4-7閱讀：435

1.收到細胞株,，*時間要鏡檢：觀察細胞形態(tài)是否正常,，對于貼壁細胞則要注意看貼壁情況是否很好，觀察細胞密度,，有疑議及時咨提供細胞的技術人員,。由于運輸?shù)臅r間或者溫度的變化，很多貼壁細胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時會有點不一樣,，主要是貼壁牢固問題,。比如293T，平時貼壁就不是很牢,，在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面,，會發(fā)生大片的脫落，細胞聚集在一起,，但是細胞生長還是正常的,，通過離心收集，加以胰酶的消化,，重新打散,，又可以正常的貼壁生長。
2.當通過上一步的觀察,，細胞初步?jīng)]有任何問題時,，進行下一步操作。當收到的細胞密達到80%左右時,，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基,，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基,，置于培養(yǎng)箱中,，隨后每天觀察。細胞株在低于正常生長溫度情況下,，會調(diào)整為靜止期,，或者慢速生長期，必須恢復37度的環(huán)境至少3個小時左右,，才能重新調(diào)整到接近對數(shù)生長期的狀態(tài),，在對數(shù)生長期進行細胞的傳代會大大增加傳代的成功率，和細胞的存活率。
3.如果經(jīng)*步觀察發(fā)現(xiàn)細胞密度超過90%,，并且細胞狀態(tài)很好時,，則復溫后2個小時需要立即傳代。傳代的比例應依據(jù)不同的細胞而定,。對于生長比較快，狀態(tài)穩(wěn)定,，不易受外界影響的細胞可以一次多傳幾瓶,；對于生長較慢，細胞比較薄,，狀態(tài)容易波動的細胞類型,，一次少傳些，保證每瓶細胞密度大些,，便于穩(wěn)定生長,。至于一些比較陌生的細胞株，*次處理也可以依照第二種情況,。

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