1.收到細(xì)胞株,，*時(shí)間要鏡檢：觀察細(xì)胞形態(tài)是否正常,，對(duì)于貼壁細(xì)胞則要注意看貼壁情況是否很好,，觀察細(xì)胞密度,，有疑議及時(shí)咨提供細(xì)胞的技術(shù)人員,。由于運(yùn)輸?shù)臅r(shí)間或者溫度的變化,，很多貼壁細(xì)胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長(zhǎng)的狀態(tài)和平時(shí)會(huì)有點(diǎn)不一樣，主要是貼壁牢固問(wèn)題,。比如293T,，平時(shí)貼壁就不是很牢,，在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面，會(huì)發(fā)生大片的脫落,，細(xì)胞聚集在一起,，但是細(xì)胞生長(zhǎng)還是正常的，通過(guò)離心收集,，加以胰酶的消化,，重新打散，又可以正常的貼壁生長(zhǎng),。
2.當(dāng)通過(guò)上一步的觀察,，細(xì)胞初步?jīng)]有任何問(wèn)題時(shí)，進(jìn)行下一步操作,。當(dāng)收到的細(xì)胞密達(dá)到80%左右時(shí),，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基,；或更換新鮮的培養(yǎng)基,，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察,。細(xì)胞株在低于正常生長(zhǎng)溫度情況下,，會(huì)調(diào)整為靜止期，或者慢速生長(zhǎng)期,，必須恢復(fù)37度的環(huán)境至少3個(gè)小時(shí)左右,，才能重新調(diào)整到接近對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的狀態(tài)，在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期進(jìn)行細(xì)胞的傳代會(huì)大大增加傳代的成功率,，和細(xì)胞的存活率,。
3.如果經(jīng)*步觀察發(fā)現(xiàn)細(xì)胞密度超過(guò)90%，并且細(xì)胞狀態(tài)很好時(shí),，則復(fù)溫后2個(gè)小時(shí)需要立即傳代,。傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細(xì)胞而定。對(duì)于生長(zhǎng)比較快,，狀態(tài)穩(wěn)定,，不易受外界影響的細(xì)胞可以一次多傳幾瓶；對(duì)于生長(zhǎng)較慢,，細(xì)胞比較薄,，狀態(tài)容易波動(dòng)的細(xì)胞類型，一次少傳些,，保證每瓶細(xì)胞密度大些，便于穩(wěn)定生長(zhǎng),。至于一些比較陌生的細(xì)胞株,，*次處理也可以依照第二種情況。