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羅斯肉瘤病毒PCR檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)原理

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羅斯肉瘤病毒PCR檢測試劑盒說明書

本產(chǎn)品是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品, 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs,、MgCl2、反應(yīng)緩沖液,、PCR 增強(qiáng)劑,、上樣染料等所有PCR 所需要的成分,用戶只需加入模板和引物即可進(jìn)行PCR 反應(yīng),,具有廣泛的用途,。
1. 方便,用戶只需準(zhǔn)備模板和引物既可以進(jìn)行PCR 實(shí)驗(yàn),。
2. 快捷,,操作步驟已經(jīng)限度地簡化,能減少污染,,降低實(shí)驗(yàn)誤差,。
3. 本產(chǎn)品A 型含電泳染料,PCR 反應(yīng)液可直接上樣電泳,,進(jìn)一步簡化了操作,。
4. 由于各成分的濃度和比例都經(jīng)過精心優(yōu)化,反應(yīng)的靈敏度高,,特異性強(qiáng),。能擴(kuò)增各種常見的DNA 樣品。
5. 產(chǎn)物可直接用于T 載體克隆,,不需要額外的加A 反應(yīng)。
使用及效果:將本產(chǎn)品15 μL 與用戶自備的模板,,引物和水共15 μL 混合后,,直接進(jìn)行PCR反應(yīng)(PCR 參數(shù)由用戶自己確定),反應(yīng)結(jié)束后直接取10 μL 電泳檢查擴(kuò)增結(jié)果,。
羅斯肉瘤病毒PCR檢測試劑盒技術(shù)特點(diǎn):
1,、準(zhǔn)確可靠,臨床雙盲對照試驗(yàn)>1000例,結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)測序法比對,,結(jié)果一致性大于99%,。
2、高靈敏:可檢測低至10ng的人基因組DNA,。
3,、快速:整個檢測流程只需3小時。
4,、簡便:試劑盒提供預(yù)混好的試劑,,使體系配置操作簡便。
5,、防污染
6,、高特異性:雙重特異性組成,保證檢測結(jié)果的特異性和準(zhǔn)確性引物與DNA互補(bǔ)鏈結(jié)合必需*配對,,才能延伸,。探針特異性與所檢測基因的PCR產(chǎn)物配對,在延伸中產(chǎn)生熒光,。
組成及試劑配制:
1,、 酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,,請臨用前15分鐘內(nèi)配制,。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),,分別配制成200 U/L,,100 U/L,50 U/L,,25 U/L,,12.5 U/L,6.25 U/L,,3.12 U/L,,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,,混勻即可,,其余濃度以此類推。
3,、 樣品稀釋液:1×20ml,。
4,、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5,、 檢測稀釋液B:1×10ml,。
羅斯肉瘤病毒PCR檢測試劑盒要自備的器材:
1.儀器:分析天平、離心機(jī),、熒光 PCR 擴(kuò)增儀,、組織研磨器、-20 ℃冰箱,、可調(diào)移液器(2 µL,、20
µL、200 µL,、1000 µL),。
2.耗材:熒光 PCR反應(yīng)管、眼科剪,、眼科鑷,、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管,、吸頭(10 µL,、200 µL、1000 µL),、滅菌雙蒸水,。
具有下列特點(diǎn):
1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,,操作簡單,,定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,,特異性強(qiáng),。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料,,PCR 后可以直接上樣電泳,。
4. 提供陽性對照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果,。
準(zhǔn)備物品:
清理液(A)                                   毫升
染色液(t B)                                   微升
稀釋液(C)                                   毫升
溶解液(tD)                                   毫升
產(chǎn)品說明書                                   1份
操作方法:
1產(chǎn)品名稱直接測定
2測定準(zhǔn)備
3背景對照測定
4樣品活性測定
5計(jì)算樣品活性
羅斯肉瘤病毒PCR檢測試劑盒備注:
1.本產(chǎn)品為50次操作
2.操作時,,須戴手套
3.操作時,避免污染母液
4.即刻進(jìn)行熒光檢測分析 
5.本產(chǎn)品染色劑不易洗掉,,染色持久
6.本公司提供系列試劑產(chǎn)品
注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序,;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間,;4.循環(huán)次數(shù),;5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理,;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué),;8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件,。
運(yùn)輸及保存:低溫運(yùn)輸,、-20℃保存,有效期一年,。

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