扁豆凝集素（LCA）ELISA免費(fèi)代測試劑盒說明書

【中文名稱】：扁豆凝集素（LCA）ELISA免費(fèi)代測試劑盒
【產(chǎn)品規(guī)格】：96T/48T,。
【保存條件】：2-8℃低溫保存
【保質(zhì)期】：6個(gè)月，所有試劑盒均提供批次,。
【試劑盒成分】：酶標(biāo)板,，試劑，標(biāo)準(zhǔn)品等,。ELISA試劑盒檢測范圍：人,、綿羊、小鼠,、大鼠,、豬、兔,、山羊,、牛、馬、豬,、其它動(dòng)物細(xì)胞因子,、植物細(xì)胞因子、骨代謝,、細(xì)胞凋亡,、激素內(nèi)分泌、活性多肽,、肝纖維化,、自身抗體、血栓與止血,、腫瘤,、自身抗體科研Elisa檢測試劑盒。 主要用于科研方面,，不用于臨床診斷,。可以用于檢測各種指標(biāo),。
扁豆凝集素（LCA）ELISA免費(fèi)代測試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中維生素C(VC)水平,。用純化的維生素C(VC)抗體包被微孔板，制成固相抗體,，往包被單抗的微孔中依次加入維生素C(VC),，再與HRP標(biāo)記的維生素C(VC)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的維生素C(VC)呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中維生素C(VC)濃度,。 
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樣本處理及要求
 
1.組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后,，稱取重量。加入一定量的PBS,，PH7.4,。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4）,，用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分,。離心20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清,。分裝后一份待檢測,，其余冷凍備用。
 
2. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),，可將標(biāo)本放于-20℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
 
3. 不能檢測含NaN3 的樣品，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性,。
 
扁豆凝集素（LCA）ELISA免費(fèi)代測試劑盒操作步驟
 
1.標(biāo)準(zhǔn)品的加樣：設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL
 
2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）,、待測樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品終稀釋度為5倍）,。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動(dòng)混勻,。
 
3.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑100μl，空白孔除外,。
 
4.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘,。
 
5.配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
 
6.洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體,，甩干，每孔加滿洗滌液,，靜置30秒后棄去,，如此重復(fù)5次，拍干,。
 
7.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl,，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色15分鐘.
 
8.終止：每孔加終止液50μl,，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）,。
 
9.測定：以空白孔調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）,。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。
扁豆凝集素（LCA）ELISA免費(fèi)代測試劑盒注意事項(xiàng)
 
1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完,，板條應(yīng)裝入密封袋中保存,。
 
2. 濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,，洗滌時(shí)不影響結(jié)果,。
 
3. 各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,，以避免試驗(yàn)誤差,。一次加樣時(shí)間好控制在5 分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多,，推薦使用排槍加樣,。
 
4. 請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，好做復(fù)孔,。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD 值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔di一孔的OD 值）,，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n 倍）后再測定，計(jì)算時(shí)后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）,。
 
5. 封板膜只限一次性使用,，以避免交叉污染。
 
6. 底物請避光保存,。
 
7. 嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
 
8. 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,。
 
9. 本試劑不同批號組分不得混用,。
 
10. 試劑盒2-8℃冷藏，保質(zhì)期6個(gè)月,。