植物維生素C（VC）ELISA免費代測試劑盒說明書

【中文名稱】：植物維生素C(VC)ELISA免費代測試劑盒
【英文名稱】：Plant Human Vitamin C,VC ELISA Kit 
【產品規(guī)格】：96T/48T。
【保存條件】：2-8℃低溫保存
【保質期】：6個月,，所有試劑盒均提供批次,。
【試劑盒成分】：酶標板，試劑,，標準品等,。ELISA試劑盒檢測范圍：人、綿羊,、小鼠,、大鼠、豬,、兔,、山羊,、牛,、馬、豬,、其它動物細胞因子,、植物細胞因子、骨代謝,、細胞凋亡,、激素內分泌,、活性多肽、肝纖維化,、自身抗體,、血栓與止血、腫瘤,、自身抗體科研Elisa檢測試劑盒,。 主要用于科研方面，不用于臨床診斷,?？梢杂糜跈z測各種指標。
植物維生素C（VC）ELISA免費代測試劑盒實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中維生素C(VC)水平,。用純化的維生素C(VC)抗體包被微孔板,，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入維生素C(VC),，再與HRP標記的維生素C(VC)抗體結合,，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過*洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,，并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的維生素C(VC)呈正相關,。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值）,，通過標準曲線計算樣品中維生素C(VC)濃度。 
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樣本處理及要求

1.組織標本：切割標本后,，稱取重量,。加入一定量的PBS，PH7.4,。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4）,，用手工或勻漿器將標本勻漿充分,。離心20 分鐘左右（2000-3000 轉/分）。仔細收集上清,。分裝后一份待檢測,，其余冷凍備用,。

2. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行,，提取后應盡快進行實驗,。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存,，但應避免反復凍融.

3. 不能檢測含NaN3 的樣品,，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

植物維生素C（VC）ELISA免費代測試劑盒操作步驟

1.標準品的加樣：設置標準品孔和樣本孔,，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL

2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑,，其余各步操作相同）、待測樣品孔,。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,，然后再加待測樣品10μl（樣品終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部,，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻。

3.加酶：每孔加入酶標試劑100μl,，空白孔除外,。

4.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。

5.配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用,。

6.洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體，甩干,，每孔加滿洗滌液,，靜置30秒后棄去，如此重復5次,，拍干,。

7.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl,，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色15分鐘.

8.終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）,。

9.測定：以空白孔調零,，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行,。
植物維生素C（VC）ELISA免費代測試劑盒注意事項

1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,，酶標包被板開封后如未用完,，板條應裝入密封袋中保存,。

2. 濃洗滌液可能會有結晶析出,，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果,。

3. 各步加樣均應使用加樣器,，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差,。一次加樣時間好控制在5 分鐘內,，如標本數量多，推薦使用排槍加樣,。

4. 請每次測定的同時做標準曲線,，好做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD 值大于標準品孔di一孔的OD 值）,，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n 倍）后再測定,，計算時請后乘以總稀釋倍數（×n×5）。

5. 封板膜只限一次性使用,，以避免交叉污染,。

6. 底物請避光保存。

7. 嚴格按照說明書的操作進行,，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

8. 所有樣品,，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9. 本試劑不同批號組分不得混用,。

10. 試劑盒2-8℃冷藏,，保質期6個月。