人曲霉菌抗原（AspergillusAg）ELISA試劑盒說明書
本試劑盒僅供研究使用,。
實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人曲霉菌抗原（AspergillusAg）表達(dá),。用純化的體包被微孔板,，制成固相抗體,，可與樣品中曲霉菌抗原（AspergillusAg）相結(jié)合,，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗原和其他成分后再與HRP標(biāo)記的抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色,。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值）,，與CUTOFF值相比較，從而判定標(biāo)本中人曲霉菌抗原（AspergillusAg）的存在與否,。
人曲霉菌抗原（AspergillusAg）ELISA試劑盒組成
130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶
2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8陽性對(duì)照0.5ml×1瓶
3酶標(biāo)包被板12孔×8條9陰性對(duì)照0.5ml×1瓶
4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份
5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張
6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)
人曲霉菌抗原（AspergillusAg）ELISA試劑盒操作步驟
1.編號(hào)：將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),，每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照2孔、陽性對(duì)照2孔,、空白對(duì)照1孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,，其余各步操作相同）
2.加樣：分別在陰、陽性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照,、陽性對(duì)照50μl,。然后在待測(cè)樣品孔先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl,。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻,，
3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。
4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體,，甩干,，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次,，拍干,。
6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外,。
7.溫育：操作同3,。
8.洗滌：操作同5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl,，再加入顯色劑B50μl,，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10.終止：每孔加終止液50μl,，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）,。
11.測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）,。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。
人曲霉菌抗原（AspergillusAg）ELISA試劑盒注意事項(xiàng)
1．操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行，本試劑不同批號(hào)組分不得混用,。
2．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存,。
3．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果,。
4．封板膜只限一次性使用,，以避免交叉污染。
5．底物請(qǐng)避光保存,。
6．試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn),，使用雙波長(zhǎng)檢測(cè)時(shí)，參考波長(zhǎng)為630nm
7．所有樣品,，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,。終止液為2M的硫酸，使用時(shí)必須
注意安全,。
保存條件及有效期
1．試劑盒保存：2-8℃,。
2．有效期：6個(gè)月