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A7R5;大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞使用說(shuō)明書(shū)

時(shí)間:2017-8-29閱讀:192
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A7R5,;大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞使用說(shuō)明書(shū):
免疫類(lèi)型:    不祥
物種來(lái)源:    哺乳動(dòng)物
相關(guān)疾病:    無(wú)
組織來(lái)源:    新鮮
品系:    ATCC CRL-1444
細(xì)胞類(lèi)型:    培養(yǎng)到穩(wěn)定期后細(xì)胞表現(xiàn)出長(zhǎng)高的肌激酶和肌氨酸磷酸激酶活性(CPK),。 細(xì)胞分裂終止后合成骨肉型CPK,。
數(shù)量:    現(xiàn)貨
規(guī)格:    T25
細(xì)胞接受后處理
1) 收到細(xì)胞后,,請(qǐng)檢查是否漏液 ,如果漏液,,請(qǐng)拍照片發(fā)給我們,。
 
 2) 請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng) 狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h,。
 
 3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,,添加 6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
 
 4) 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%請(qǐng)及 時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代,,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基,。
 
 5) 接到細(xì)胞次日,請(qǐng)檢查細(xì)胞是 否污染,,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,,請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉谩?br /> 
一.貼壁細(xì)胞  
客戶接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過(guò)的)培養(yǎng)瓶外部,。
肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張),。
顯微鏡觀察細(xì)胞,當(dāng)細(xì)胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),,細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理,。如未達(dá)到細(xì)胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。
嚴(yán)格無(wú)菌操作,,打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),,放入另一無(wú)菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞),。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,,加入終止液終止。 
1000rpm,5min離心,,重懸細(xì)胞,。換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2  培養(yǎng),。

二.懸浮A7R5,;大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 
1. 接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過(guò)的)培養(yǎng)瓶外部,。
2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張),。
3. 嚴(yán)格無(wú)菌操作,,打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),。
5. 1000rpm,5min離心,,重懸細(xì)胞。 換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,,37℃,5%CO2  培養(yǎng),。

三.2ml小管操作方法。 
1. 用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過(guò)的),。
2. 嚴(yán)格無(wú)菌操作,,用吸管吸出管中細(xì)胞至6ml*培養(yǎng)基混勻。
3.換新的A7R5,;大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)瓶,,37℃,5%CO7  培養(yǎng)。

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