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少量細胞標本的制備實驗步驟

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少量細胞標本的制備實驗步驟

(1)取材:少量細胞連同培養(yǎng)基一起移人離心管中,800r/min離心5min。細胞沉淀加4%的多聚甲醛,,輕輕混勻4℃固定1h,。PBS緩沖液漂洗,800r/min離心5min,,連續(xù)3次,。將微量移液管的塑料槍頭過火焰,使其成為封閉的錐形管,,將細胞沉淀(約200μl)移入管內(nèi),,加5μl新鮮人血漿,輕輕混勻后,,然后加入2.5%戊二醛(pH 7. 2~7.3,。0.1moL/L PBS緩沖液配制)100μl,再輕輕混勻,,4℃靜止4h,。離心條件同前。刀片切去槍頭的末端,,用細針挑出細小的細胞團塊,,PBS緩沖液漂洗多次。

(2)固定:1%鋨酸固定2h,,PBS緩沖液漂洗,、丙酮脫水,包埋,,染色,,切片自然干燥后觀察。
小鼠神經(jīng)干細胞     Mouse
小鼠海馬神經(jīng)膠質(zhì)細胞(EGFP標記)     Mouse
小鼠皮層神經(jīng)膠質(zhì)細胞(EGFP標記)     Mouse
小鼠神經(jīng)干細胞(EGFP標記)     Mouse
人腦微血管內(nèi)皮細胞     Human
人腦血管平滑肌細胞     Human
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