1,、實(shí)驗(yàn)材料 
2,5%碘酒,、75%酒精、無(wú)菌棉簽和棉球,、鑷子、20-22號(hào)無(wú)菌腰穿針,、吸管,、培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)液（PRMI 1640,、199,、F10,、F12）、小牛血清,、秋水仙素,、KCL,、甲醇、冰醋酸,、培養(yǎng)皿,、蓋玻片等,。 
2、培養(yǎng)液配制 
F-12 85% 
小牛血清 15% 
雙抗 100u/ml 
小瓶貯藏 4-8℃ 
3,、操作過(guò)程 
A（蓋玻片培養(yǎng)法） 
（1）采樣：選擇妊娠13-14周婦女,，在無(wú)菌條件下抽取羊水5ml,，立即注入無(wú)菌離心管中；（2）收集：離心分離細(xì)胞,，1000rpm10分鐘,，去上清,，留0.5ml，輕打混勻,；（3）接種：30mm培養(yǎng)皿中放蓋玻片1張,，每片滴混勻的細(xì)胞液1-2滴，置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)30-60分鐘,；（4）培養(yǎng)：取出后從蓋玻片外加培養(yǎng)液2ml，靜置培養(yǎng)48小時(shí)后觀察細(xì)胞生殖狀況并定時(shí)換液,，5-10天后,，可見大量成纖維細(xì)胞或上皮樣細(xì)胞生長(zhǎng)；（5）終止培養(yǎng)：當(dāng)有大量圓形發(fā)亮細(xì)胞出現(xiàn)時(shí),，加秋水仙素0.02-0.04ug/ml,，作用10-12小時(shí)；（6）低滲：倒掉培養(yǎng)液,，加預(yù)溫37℃0.075MKCL溶液5ml，37℃溫育30分鐘,，鏡下可見脹大的羊水細(xì)胞,，加0.5-1ml 3∶1甲醇：冰醋酸固定液預(yù)固定；（7）固定：倒掉低滲液,，加5ml固定液固定30分鐘以上，反復(fù)3次,；（8）干燥：將附有細(xì)胞的蓋玻片斜放于培養(yǎng)皿中,，置80℃烤箱處理2-3小時(shí)；（9）膠片：將附有細(xì)胞的蓋玻片用樹脂膠封固于玻片上,，正面朝外，小心細(xì)胞破壞,； 
B（常規(guī)培養(yǎng)法） 
（1）—（2）相同于蓋玻片培養(yǎng)法,；（3）接種：將混勻的羊水細(xì)胞種置于50ml或100ml細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),，平均10ml羊水細(xì)胞收集的細(xì)胞種置一瓶加5-10ml混合培養(yǎng)液。（4）培養(yǎng)：酒精燈火先封口,，靜置培養(yǎng)48小時(shí)后觀察細(xì)胞貼臂及生長(zhǎng)情況,，5-10天后可見瓶底面有大量羊水細(xì)胞生長(zhǎng)；（5）終止培養(yǎng)：同A法,；（6）細(xì)胞收集：將培養(yǎng)液倒入一干凈離心管中，加0.025%的胰蛋白酶0.5-1ml/瓶,，輕輕搖動(dòng),，使培養(yǎng)瓶底面*接觸消化酶，然后用彎頭吸管吹打,，待細(xì)胞全部脫落后加前培養(yǎng)液終止胰蛋白酶消化。用吸管移細(xì)胞懸液于離心管中,。1000-2000rpm10分鐘,，棄上清，留細(xì)胞沉慮,。若一次消化不*,，可反復(fù)消化,；（7）低滲及預(yù)固定：加預(yù)溫37℃KCL溶液10ml，37℃溫育30分鐘,，加0.5-1ml新鮮配制的3∶1甲醇冰乙酸固定液預(yù)固定，用氣泡吹打細(xì)胞使其混勻,。（8）固定：用新鮮配制的3∶2甲冰固定三次,，每次30分鐘,。固定液加入時(shí)沿管壁緩慢加入；（9）制片及干燥：用絨毛制片,；