植物細(xì)胞培養(yǎng)基組成和培養(yǎng)條件

培養(yǎng)基的組成對(duì)植物細(xì)胞的生長(zhǎng)和代謝物質(zhì)的影響極大,。典型的培養(yǎng)基有Murashige-Skoog(MS),Linsmaier-Skoog(LS),，white和B5等四種。

無(wú)機(jī)鹽類(lèi)：在無(wú)機(jī)鹽中,，磷酸根及氮源(NH4+或N03-)的含量對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)與物質(zhì)有明顯的影響,。另外，一些金屬離子如Ca2+,、Cu2+,、 Mg2+等的含量往往也有重要影響。---碳源：通常使用2―3%的蔗糖作碳源,，也有使用葡萄糖或果糖,。使用單糖的優(yōu)點(diǎn)是方便分析測(cè)定，且有助于細(xì)胞生長(zhǎng)動(dòng)力學(xué)分析,。

植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)：植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)對(duì)植物細(xì)胞的生長(zhǎng)和代謝物質(zhì)的影響十分大,。它可分為兩大類(lèi)：植物生長(zhǎng)素類(lèi)有2，4―D(二氯苯氧基乙酸),、IAA(吲哚基醋酸),、NAA(萘乙酸)等，細(xì)胞激動(dòng)素類(lèi)有BA(芐基腺凜吟),、動(dòng)力精和玉米素,。

其他因素：植物細(xì)胞培養(yǎng)的影響因素還有培養(yǎng)系統(tǒng)內(nèi)氣相組成(CO2和乙烯含量)、前體物質(zhì),、氨基酸,、維生素及誘導(dǎo)劑等。

培養(yǎng)條件

溫度：培養(yǎng)溫度對(duì)植物細(xì)胞生長(zhǎng)及二次代謝產(chǎn)物生成有重要影響,。通常,，植物細(xì)胞培養(yǎng)采用25℃。

攪拌：在搖瓶實(shí)驗(yàn)中,，通常搖床的轉(zhuǎn)速取90―120r/min,。

pH值：通過(guò)細(xì)胞膜進(jìn)行的H+離子傳遞對(duì)細(xì)胞的生育環(huán)境、生理活性來(lái)說(shuō)無(wú)疑是重要的,。在培養(yǎng)過(guò)程中,，通常pH作為一個(gè)重要參數(shù)被控制在一定范圍內(nèi)。植物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH值一般為5―6,。

通氣：通氣是細(xì)胞液體深層培養(yǎng)重要的物理化學(xué)因子,。好氣培養(yǎng)系統(tǒng)的通氣與混合及攪拌是相互關(guān)聯(lián)的。對(duì)搖瓶試驗(yàn),，通常500m1的三角瓶?jī)?nèi)裝80―200m1的植物細(xì)胞培養(yǎng)液較適宜,。當(dāng)然，氣液傳質(zhì)還與瓶塞的材料有關(guān),。試驗(yàn)表明,，從溶氧速率考慮,，以棉花塞，微孔硅橡膠塞次之,，鋁箔塞zui差,。

光：光對(duì)植物有著特殊的作用。光照射條件不僅通過(guò)光照周期,、光的質(zhì)量(即種類(lèi),、波長(zhǎng))而且通過(guò)光照量(光強(qiáng)度)的調(diào)節(jié)來(lái)影響植物細(xì)胞的生理特性和培養(yǎng)特性。研究表明,，光調(diào)節(jié)著細(xì)胞中的關(guān)鍵酶的活性,，有時(shí)光能大大促進(jìn)代謝產(chǎn)物的生成，有時(shí)卻起著阻害作用,。

細(xì)胞齡：在培養(yǎng)過(guò)程的不同時(shí)期,，細(xì)胞的生理狀況、生長(zhǎng)與物質(zhì)能力差異顯著,。而且,，使用不同細(xì)胞齡的種細(xì)胞，其后代的生長(zhǎng)與物質(zhì)狀況也會(huì)大不一樣,。通常,，使用處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期后期或穩(wěn)定期前期的細(xì)胞作為接種細(xì)胞較合適。

接種量：在植物細(xì)胞培養(yǎng)中,，接種量也是一個(gè)影響因素,。在再次培養(yǎng)中，往往取前次培養(yǎng)液的5―20%作為種液,，也以接種細(xì)胞濕重為基準(zhǔn),，其接種濃度為15―50g(濕細(xì)胞)/L。由于接種量對(duì)細(xì)胞產(chǎn)率及二次代謝物質(zhì)的有一定影響,，故應(yīng)根據(jù)不同的培養(yǎng)對(duì)象通過(guò)試驗(yàn)，確定其zui大接種量,。