污染是細(xì)胞培養(yǎng)的大敵常見的污染類型

細(xì)胞培養(yǎng)過程中的污染不僅僅指微生物，而且還包括所有混入培養(yǎng)環(huán)境中的,、對細(xì)胞生存有害或造成細(xì)胞不純的物質(zhì),，包括生物和化學(xué)物質(zhì)。

1,、細(xì)菌污染

細(xì)菌污染是實驗室細(xì)胞培養(yǎng)中常見的污染,，即使在細(xì)胞培養(yǎng)液中加入了抗菌素，也可能因為操作不慎而引起污染,。zui常見的有革蘭氏陽性菌,，如枯草桿菌以及大腸桿菌、假單胞菌等革蘭氏陰性菌,，其中又以白色葡萄球菌較常見,。

培養(yǎng)細(xì)胞受細(xì)菌污染后，會出現(xiàn)培養(yǎng)液變混濁,，pH改變,。污染后細(xì)胞發(fā)生病理改變，胞內(nèi)顆粒增多,、增粗,，zui后變圓脫落死亡。

2,、支原體污染

支原體是介于細(xì)菌與病毒之間能獨立生活的zui小微生物,，zui小直徑0.2μm，一般過濾除菌無法去除它,，光鏡下難以看清它的形態(tài)結(jié)構(gòu),。開始不易發(fā)現(xiàn)，能在偏堿條件下生存,，對青霉素有抗藥性,。多吸附于細(xì)胞表面或散在于細(xì)胞之間。

培養(yǎng)細(xì)胞受支原體污染后,，部分敏感細(xì)胞可見細(xì)胞生長增殖變慢,，部分細(xì)胞變圓，從瓶壁脫落,。但多數(shù)細(xì)胞污染后無明顯變化,，或略有變化，若不及時處理,，還會產(chǎn)生交叉污染,。

3,、病毒污染

組織細(xì)胞培養(yǎng)過程中，如果沒有除去潛在的病毒,，就會產(chǎn)生病毒污染,。目前，從原代猴腎細(xì)胞的培養(yǎng)中已發(fā)現(xiàn)不少于20種血清性病毒,。

盡管病毒污染的細(xì)胞不影響原代培養(yǎng),，但疫苗是不安全的。因此,，潛在病毒是細(xì)胞大量和疫苗,、干擾素等生物制品制作中的難題。

4,、真菌污染

真菌污染是細(xì)胞培養(yǎng)過程中zui常見的一種,，zui常見的真菌有煙曲霉、黑曲菌,、孔子霉,、毛霉菌、白色念珠菌和酵母菌,。

培養(yǎng)細(xì)胞受真菌污染后,，可見培養(yǎng)液中漂浮著白色或淺黃色的小點，有的散在生長,，培養(yǎng)液一般不發(fā)生混濁;倒置顯微鏡下可見絲狀,、管狀或樹枝狀的菌絲縱橫交錯在細(xì)胞之間或培養(yǎng)基中，有的呈鏈狀排列,。

真菌污染后,，細(xì)胞生長變慢，但zui后由于營養(yǎng)耗盡及毒性作用而使細(xì)胞脫落死亡,。

5、非同種細(xì)胞污染

由于細(xì)胞培養(yǎng)操作時各細(xì)胞株所需的器材和溶液沒有嚴(yán)格分開,，往往會使一種細(xì)胞被另一種細(xì)胞污染,。目前，世界上已有幾十種細(xì)胞都被HeLa細(xì)胞所污染,，致使許多實驗宣告無效,。

非細(xì)胞培養(yǎng)物所造成的化學(xué)成分的污染也偶有發(fā)生，大多是由于細(xì)胞培養(yǎng)所需物品清洗消毒不*而帶入一些有毒化學(xué)物質(zhì)所致,。