污染是細胞培養(yǎng)的大敵常見的污染類型

細胞培養(yǎng)過程中的污染不僅僅指微生物，而且還包括所有混入培養(yǎng)環(huán)境中的,、對細胞生存有害或造成細胞不純的物質(zhì),，包括生物和化學物質(zhì)。

1,、細菌污染

細菌污染是實驗室細胞培養(yǎng)中常見的污染,，即使在細胞培養(yǎng)液中加入了抗菌素，也可能因為操作不慎而引起污染,。zui常見的有革蘭氏陽性菌,，如枯草桿菌以及大腸桿菌、假單胞菌等革蘭氏陰性菌,，其中又以白色葡萄球菌較常見,。

培養(yǎng)細胞受細菌污染后，會出現(xiàn)培養(yǎng)液變混濁,，pH改變,。污染后細胞發(fā)生病理改變，胞內(nèi)顆粒增多,、增粗,，zui后變圓脫落死亡。

2,、支原體污染

支原體是介于細菌與病毒之間能獨立生活的zui小微生物,，zui小直徑0.2μm，一般過濾除菌無法去除它,，光鏡下難以看清它的形態(tài)結(jié)構(gòu),。開始不易發(fā)現(xiàn)，能在偏堿條件下生存,，對青霉素有抗藥性,。多吸附于細胞表面或散在于細胞之間。

培養(yǎng)細胞受支原體污染后,，部分敏感細胞可見細胞生長增殖變慢,，部分細胞變圓，從瓶壁脫落,。但多數(shù)細胞污染后無明顯變化,，或略有變化，若不及時處理,，還會產(chǎn)生交叉污染,。

3、病毒污染

組織細胞培養(yǎng)過程中，如果沒有除去潛在的病毒,，就會產(chǎn)生病毒污染。目前,，從原代猴腎細胞的培養(yǎng)中已發(fā)現(xiàn)不少于20種血清性病毒,。

盡管病毒污染的細胞不影響原代培養(yǎng)，但疫苗是不安全的,。因此,，潛在病毒是細胞大量和疫苗、干擾素等生物制品制作中的難題,。

4,、真菌污染

真菌污染是細胞培養(yǎng)過程中zui常見的一種，zui常見的真菌有煙曲霉,、黑曲菌,、孔子霉、毛霉菌,、白色念珠菌和酵母菌,。

培養(yǎng)細胞受真菌污染后，可見培養(yǎng)液中漂浮著白色或淺黃色的小點,，有的散在生長,，培養(yǎng)液一般不發(fā)生混濁;倒置顯微鏡下可見絲狀、管狀或樹枝狀的菌絲縱橫交錯在細胞之間或培養(yǎng)基中,，有的呈鏈狀排列,。

真菌污染后，細胞生長變慢,，但zui后由于營養(yǎng)耗盡及毒性作用而使細胞脫落死亡,。

5、非同種細胞污染

由于細胞培養(yǎng)操作時各細胞株所需的器材和溶液沒有嚴格分開,，往往會使一種細胞被另一種細胞污染,。目前，世界上已有幾十種細胞都被HeLa細胞所污染,，致使許多實驗宣告無效,。

非細胞培養(yǎng)物所造成的化學成分的污染也偶有發(fā)生，大多是由于細胞培養(yǎng)所需物品清洗消毒不*而帶入一些有毒化學物質(zhì)所致,。