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大鼠腎小球組織提取物注意事項;
1. 接收到,,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張),。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,,打開細胞培養(yǎng)瓶,。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞),。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,,加入終止液終止。
6.1000rpm,,5min離心,,重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,,37℃,,5%CO2培養(yǎng)。
運輸和保存:
視天氣狀況和運輸距離遠近,,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行,。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸,;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),,如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月,。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸,;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,,如懸浮的細胞較多,,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
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