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豬丹毒桿菌PCR檢測試劑盒反應五要素：
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物,、酶、dNTP,、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵,，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,，只要知道任何一段模板DNA序列,， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增,。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp,，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜,，特定條件下可擴增長至10kb的片段,。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳,，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶,。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列,。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補,，否則會形成引物二聚體,，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,，特別是最末及倒數(shù)第二個堿基,，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗,。
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