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當(dāng)前位置:上海研生實(shí)業(yè)有限公司>>技術(shù)文章>>ER elisa酶聯(lián)免疫試劑盒洗滌方法
1. 自動(dòng)洗板機(jī):每孔加入洗滌液350μl,,注入與吸出間隔60秒,。洗板5次,。
2. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,,在潔凈的吸水紙上拍干,,每孔加洗滌液350μl,,浸泡1-2分鐘,吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體,,在厚的吸水紙上拍干,。洗板5次。
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,,各試劑均應(yīng)平衡至室溫,;試劑或樣品配制時(shí),均需充分混勻,,并盡量避免起泡,。
1.加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔,、待測(cè)樣品孔,。空白孔加樣品稀釋液100μl,,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,,注意不要有氣泡,加樣時(shí)將樣品加于酶標(biāo)板底部,,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動(dòng)混勻。給酶標(biāo)板覆膜,,37℃孵育2小時(shí),。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液,。
2.棄去液體,,甩干,,每個(gè)孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜,,37℃溫育1小時(shí),。
3.棄去孔內(nèi)液體,甩干,,洗板 3次,,每次浸泡1-2分鐘,大約350μl /每孔,,甩并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干,。
干4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內(nèi)配制)100μl,加上覆膜,,37℃溫育1小時(shí),。
5.棄去孔內(nèi)液體,甩干,,洗板5次,,方法同步驟3。
6.每孔加底物溶液100μl,,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據(jù)實(shí)際顯色情況酌情縮短或延長(zhǎng),,但不可超過(guò)30分鐘。當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔出現(xiàn)明顯梯度時(shí),,即可終止),。
7.每孔加終止液50μl,終止反應(yīng),,此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色,。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。
8.立即用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)測(cè)量各孔的光密度(OD值),。應(yīng)提前打開(kāi)酶標(biāo)儀電源,,預(yù)熱儀器,設(shè)置好檢測(cè)程序,。
9.實(shí)驗(yàn)完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結(jié)束,。
植物可溶性糖含量測(cè)試盒
糖原含量測(cè)試盒
植物組織果糖含量測(cè)試盒
海藻糖含量測(cè)試盒
海藻糖酶測(cè)試盒
山梨醇含量測(cè)試盒
山梨醇脫氫酶測(cè)試盒
還原糖含量測(cè)試盒
纖維素酶(CL)測(cè)試盒
β-1,3葡聚糖酶(β-1,3-GA)測(cè)試盒
α-葡萄糖苷酶(α - GC)測(cè)試盒
β-葡萄糖苷酶(β-GC)測(cè)試盒
β-半乳糖苷酶(β-GAL)測(cè)試盒
幾丁質(zhì)酶測(cè)試盒
中性木聚糖酶測(cè)試盒
酸性木聚糖酶測(cè)試盒
堿性木聚糖酶測(cè)試盒
β-木糖苷酶測(cè)試盒
氨基比林-N-去甲基化酶(AND)測(cè)試盒
苯胺-4羥化酶(AH)測(cè)試盒
紅霉素-N-脫甲基酶(ERND)測(cè)試盒
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