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ER elisa酶聯(lián)免疫試劑盒洗滌方法

時間:2022/9/6閱讀:287
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ER elisa酶聯(lián)免疫試劑盒洗滌方法:

1. 自動洗板機:每孔加入洗滌液350μl,,注入與吸出間隔60秒,。洗板5次,。

2. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,,在潔凈的吸水紙上拍干,每孔加洗滌液350μl,,浸泡1-2分鐘,,吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體,在厚的吸水紙上拍干,。洗板5次,。

實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫,;試劑或樣品配制時,,均需充分混勻,并盡量避免起泡,。

1.加樣:分別設(shè)空白孔,、標(biāo)準孔、待測樣品孔,??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準品或待測樣品100μl,,注意不要有氣泡,,加樣時將樣品加于酶標(biāo)板底部,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動混勻。給酶標(biāo)板覆膜,,37℃孵育2小時,。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準品溶液,。

2.棄去液體,,甩干,每個孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內(nèi)配制),,酶標(biāo)板加上覆膜,,37℃溫育1小時。

3.棄去孔內(nèi)液體,,甩干,,洗板 3次,,每次浸泡1-2分鐘,大約350μl /每孔,,甩并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干,。

干4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內(nèi)配制)100μl,加上覆膜,,37℃溫育1小時,。

5.棄去孔內(nèi)液體,甩干,,洗板5次,,方法同步驟3。

6.每孔加底物溶液100μl,,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據(jù)實際顯色情況酌情縮短或延長,,但不可超過30分鐘。當(dāng)標(biāo)準孔出現(xiàn)明顯梯度時,,即可終止),。

7.每孔加終止液50μl,終止反應(yīng),,此時藍色立轉(zhuǎn)黃色,。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。

8.立即用酶標(biāo)儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值),。應(yīng)提前打開酶標(biāo)儀電源,,預(yù)熱儀器,設(shè)置好檢測程序,。

9.實驗完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結(jié)束,。

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