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倉(cāng)鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)elisa試劑盒洗滌方法:
1. 自動(dòng)洗板機(jī):每孔加入洗滌液350μl,,注入與吸出間隔60秒。洗板5次,。
2. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,,在潔凈的吸水紙上拍干,,每孔加洗滌液350μl,,浸泡1-2分鐘,,吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體,在厚的吸水紙上拍干,。洗板5次,。
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫,;試劑或樣品配制時(shí),,均需充分混勻,并盡量避免起泡,。
1.加樣:分別設(shè)空白孔,、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔,??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,,注意不要有氣泡,加樣時(shí)將樣品加于酶標(biāo)板底部,,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動(dòng)混勻。給酶標(biāo)板覆膜,,37℃孵育2小時(shí),。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液,。
2.棄去液體,,甩干,,每個(gè)孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜,,37℃溫育1小時(shí),。
3.棄去孔內(nèi)液體,甩干,,洗板 3次,,每次浸泡1-2分鐘,大約350μl /每孔,,甩并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干,。
干4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內(nèi)配制)100μl,加上覆膜,,37℃溫育1小時(shí),。
5.棄去孔內(nèi)液體,甩干,,洗板5次,,方法同步驟3。
6.每孔加底物溶液100μl,,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據(jù)實(shí)際顯色情況酌情縮短或延長(zhǎng),,但不可超過(guò)30分鐘。當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔出現(xiàn)明顯梯度時(shí),,即可終止),。
7.每孔加終止液50μl,終止反應(yīng),,此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色,。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。
8.立即用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)測(cè)量各孔的光密度(OD值),。應(yīng)提前打開酶標(biāo)儀電源,,預(yù)熱儀器,設(shè)置好檢測(cè)程序,。
9.實(shí)驗(yàn)完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結(jié)束,。
AGPS衰老相關(guān)蛋白5抗體
phospho-alpha B Crystallin (Ser59)磷酸化熱休克蛋白β5/αb晶體蛋白質(zhì)/α-晶體蛋白b鏈抗體
AMBN釉基質(zhì)蛋白抗體
phospho-AMPK alpha 2 (Ser176)磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體
phospho-AMPK alpha 2 (Ser491)磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體
phospho-Androgen Receptor (Ser515)磷酸化雄激素受體抗體
phospho-Androgen Receptor (Ser791)磷酸化雄激素受體抗體
phospho-Androgen Receptor (Ser94)磷酸化雄激素受體抗體
phospho-Androgen Receptor (Tyr363)磷酸化雄激素受體抗體
ANKK1錨定蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白激酶ANKK1抗體
phospho-alpha Adducin (Thr445)磷酸化內(nèi)收蛋白抗體
Annexin A11膜粘連蛋白11抗體
Annexin A13膜粘連蛋白13抗體
phospho-ACTH (Ser168)磷酸化促腎上腺皮質(zhì)激素ACTH抗體
phospho-AKT1 (Ser246)磷酸化蛋白激酶AKT1抗體
phospho-AKT1/3 (Tyr473)磷酸化蛋白激酶B抗體
phospho-alpha 1 Sodium Potassium ATPase (Tyr260) 磷酸化鈉鉀ATP酶蛋白a1抗體
phospho-alpha Adducin(Ser436)磷酸化內(nèi)收蛋白a1抗體
phospho-AMPK alpha 1 (Ser487)磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體
phospho-AMPK alpha 2 (Ser345)磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體
ASAH1酸性神經(jīng)酰胺酶1抗體
ADRM1粘附調(diào)節(jié)分子1抗體
Aphrodisin氣味結(jié)合蛋白抗體
ALDH2乙醛脫氫酶2抗體
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