人嗜鉻蛋白A(CgA)免疫組化試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟：

1.烤片： 將待做切片置于切片架上,，于60℃恒溫烤箱中至少烤1 hr,；石蠟包埋組織切片3~4μm 厚度

2.脫蠟： 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟3 次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ,、Ⅲ）,，每次10 min；

3.水化： 切片經(jīng)下行酒精水化,，無水乙醇5min,，95%乙醇2 次（每次2min），85%乙醇2 min,；75%乙醇2min,，自來水沖洗，ddH2O 洗2×2min,；

4.抗原修復(fù)： 根據(jù)抗體說明書推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù),，常采用高壓、微波（溫度達(dá)到98~100℃）或酶消化修復(fù)法,，室溫自然冷卻,，自來水沖洗，ddH2O 洗2×2min,，TBS 洗滌（2×2min）（具體修復(fù)方法見附1）* 注：有些抗原勿需修復(fù),，

直接進(jìn)入第5 步封閉。

5.封閉： 滴加試劑B,，37℃濕盒孵育30 min,；

6.加一抗：滴加用試劑C（即用型一抗），37℃濕盒孵育2 hr 或4℃過夜,；

7.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）,；

8.封閉： 滴加試劑B，37℃濕盒孵育10 min；

9.加二抗： 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗（試劑D）,，37℃濕盒中孵育30 min,；

10.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）；

11.封閉： 滴加試劑Tween 20,，37℃濕盒孵育封閉20 min,；

12.加HRP-SA： 滴加用抗體稀釋液稀釋的試劑E（1：50~200，終濃度5~20 nM）,，37℃濕盒中孵育30 min,；

13.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min），TBS 洗滌（2×5 min）,；

14.顯色：應(yīng)用DAB 溶液（試劑F）顯色；

15.復(fù)染：自來水充分沖洗,，復(fù)染,，脫水，透明,；

16.封片： 待組織標(biāo)本干后,，用試劑緩沖甘油封固劑封片；

17.觀察成像： 顯微鏡下觀察成像,。

自噬相關(guān)蛋白9A抗體

醛縮酶C抗體

谷草轉(zhuǎn)氨酶抗體

三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員5抗體

三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員8抗體

?；o酶A脫氫酶長鏈抗體

酰基輔酶A脫氫酶中鏈抗體

?；o酶A脫氫酶短鏈抗體

過氧化物酶?；o酶A氧化酶1抗體

磷酸化細(xì)胞凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1抗體

轉(zhuǎn)化生長因子β誘導(dǎo)蛋白3抗體（半胱氨酸和絲氨酸富含核蛋白1）

有絲分裂激酶A/B/C抗體

蛋白酪氨酸激酶ATK抗體

長鏈脂肪酸輔酶A連接酶1/2抗體

過氧化物酶酰基輔酶A氧化酶2抗體

膽固醇?；D(zhuǎn)移酶1抗體

磷酸化間變型淋巴瘤激酶抗體

磷酸化ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白2抗體

磷酸化有絲分裂激酶B/C抗體

磷酸化腺泡Acinus蛋白抗體

磷酸化腎上腺素能受體β2抗體

APS抗體

激活素受體樣激酶1抗體

激活素A受體1B抗體

磷酸化雄激素受體抗體