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倉鼠琥珀酸脫氫酶ELISA檢測試劑盒洗滌方法:
1. 自動(dòng)洗板機(jī):每孔加入洗滌液350μl,,注入與吸出間隔60秒,。洗板5次。
2. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,,在潔凈的吸水紙上拍干,,每孔加洗滌液350μl,浸泡1-2分鐘,,吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體,在厚的吸水紙上拍干,。洗板5次,。
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫,;試劑或樣品配制時(shí),,均需充分混勻,并盡量避免起泡,。
1.加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔,、待測樣品孔,。空白孔加樣品稀釋液100μl,,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,,加樣時(shí)將樣品加于酶標(biāo)板底部,,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,。給酶標(biāo)板覆膜,37℃孵育2小時(shí),。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2.棄去液體,,甩干,,每個(gè)孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內(nèi)配制),,酶標(biāo)板加上覆膜,37℃溫育1小時(shí),。
3.棄去孔內(nèi)液體,,甩干,洗板 3次,,每次浸泡1-2分鐘,,大約350μl /每孔,,甩干并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干。
4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內(nèi)配制)100μl,,加上覆膜,,37℃溫育1小時(shí)。
5.棄去孔內(nèi)液體,,甩干,洗板5次,方法同步驟3,。
6.每孔加底物溶液100μl,,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據(jù)實(shí)際顯色情況酌情縮短或延長,,但不可超過30分鐘。當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔出現(xiàn)明顯梯度時(shí),,即可終止),。
7.每孔加終止液50μl,終止反應(yīng),,此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同,。
8.立即用酶標(biāo)儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值),。應(yīng)提前打開酶標(biāo)儀電源,預(yù)熱儀器,,設(shè)置好檢測程序,。
9.實(shí)驗(yàn)完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結(jié)束,。
人臍帶血單個(gè)核細(xì)胞
小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(EGFP標(biāo)記)
人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(hMSCs)
人間充質(zhì)干細(xì)胞-脂肪
人間充質(zhì)干細(xì)胞-肝
人間充質(zhì)干細(xì)胞-臍帶
小鼠神經(jīng)干細(xì)胞
小鼠海馬神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞(EGFP標(biāo)記)
小鼠皮層神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞(EGFP標(biāo)記)
小鼠神經(jīng)干細(xì)胞(EGFP標(biāo)記)
人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞
人腦血管平滑肌細(xì)胞
人海馬神經(jīng)元
人少突膠質(zhì)細(xì)胞
人星形膠質(zhì)細(xì)胞
小鼠成纖維細(xì)胞(EGFP標(biāo)記)
mCF, 小鼠心臟成纖維細(xì)胞
MN-c, 小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元
MN-h, 小鼠海馬神經(jīng)元
MSC, 小鼠雪旺細(xì)胞
MA, 小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞
MLF, 小鼠淋巴成纖維細(xì)胞
mRTEC, 小鼠腎小管上皮細(xì)胞
CSC, 小鼠心肌細(xì)胞
mEPC, 小鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞-骨髓
MEF, 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞
NSC,,大鼠神經(jīng)干細(xì)胞
RN-h, 大鼠海馬趾神經(jīng)元
rEPC,大鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞-骨髓
RN-c, 大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元
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