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Bradford蛋白濃度測定試劑盒使用方法:
1,、 取1ml蛋白標準配置液加入到25mgBSA的蛋白標準管中,，*溶解蛋白標準品，即為25mg/ml的蛋白標準溶液,。配制成的蛋白標準溶液 可-20℃長期保存,。
2、 取適量25mg/ml蛋白標準溶液,，稀釋至終濃度為0.5mg/ml,。標準品與蛋白樣品用同樣的溶液稀釋。但為了簡便起見,，通常使用 0.9%NaCl或PBS稀釋標準品,。
3、 做標準曲線。將標準品按0,，1,，2，4,，8,，12，16,，20ul加到96孔板中,，不足20ul的加標準品稀釋液補足到20ul。
4,、 將待測的蛋白樣品稀釋至合適濃度,，加到96孔板中，使待測樣品總體積也為20ul,。
5,、 每孔加入考馬斯亮藍G250溶液200ul，充分混勻（可將酶標板放在振蕩器上振蕩30s）,，室溫放置3-5min后,，以標準曲線0號做參比，在 595nm波長下比色測定,，記錄各孔吸光度值,。以標準品蛋白含量（ug）為橫坐標，吸光值為縱坐標,，繪出標準曲線,。
6、 如用分光光度計測定,，請在第三步的時候?qū)藴势敷w積改為1ml,，濃度梯度用生理鹽水稀釋為0，1,，2,，5，10,，15,，30ug/ml?；蚋鶕?jù)樣 品調(diào)整濃度梯度,。
7、 將樣品稀釋至合適濃度,，加到小試管中,，使待測樣品總體積也為1ml,。
8、 每只試管加考馬斯亮藍G250溶液3ml,，充分混勻,，室溫放置3-5min后，以標準曲線0號做參比,，在 595nm波長下比色測定，記錄各孔吸光度值,。
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