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鄉(xiāng)土旋毛蟲PCR檢測試劑盒組成及試劑配制

時間:2021/1/27閱讀:230
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鄉(xiāng)土旋毛蟲PCR檢測試劑盒組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)

2,、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),,分別配制成200 U/L,,100 U/L,50 U/L,,25 U/L,,12.5 U/L,6.25 U/L,,3.12 U/L,,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,,混勻即可,,其余濃度以此類推。

3,、 樣品稀釋液:1×20ml,。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml,。

5,、 檢測稀釋液B:1×10ml。   
實驗注意事項:

1)RT-PCR可以檢測組織,、細(xì)胞,、血液、細(xì)菌等很多材料,,不同的樣本有不同要求,,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;

2)客戶盡可能提供實驗的背景信息,、物種,、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;

3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品,。

4)樣本保存于液氮或干冰,,也可以保存于Trizol液中。

實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法,。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加,。運用該技術(shù)可以對DNA,、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。

主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析,、基因分型,。

主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取,、cDNA合成,、qPCR。

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