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CC16 elisa酶聯(lián)免疫試劑盒實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1. 取出試劑盒,,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘,。
2. 分組:取出 96 孔板,根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),,把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理,。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品組(6 個(gè)濃度)、空白孔,、待測(cè)樣品組,。
注:為減少實(shí)驗(yàn)誤差,保證準(zhǔn)確性,,建議設(shè)置復(fù)孔,。
3. 加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 100ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中;空白對(duì)照孔加入 100ul 的蒸餾水,;其余微孔中加入100ul 的待測(cè)樣本,。
4. 加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組、待測(cè)樣本組各孔中加入 50ul 的酶標(biāo)溶液(空白對(duì)照孔除外),。
5. 溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時(shí)。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,,靜置 15-30s,,充分清洗酶標(biāo)板 5 次,,用吸水紙*拍干。
7. 顯色:各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后,,再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止:25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,,加入 50ul 終止液,。
9. 讀板:在 450nm 波長(zhǎng)讀取各孔的 OD 值。
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