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Albumin 馬白蛋白酶聯(lián)免疫試劑盒樣本要求:
1. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于20℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟:
1. 編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,,每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔,、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,,其余各步操作相同)
2. 加樣:分別在陰,、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50%l,。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液 40%l,,然后再加待測樣品 10%l。加樣將樣品加 于酶標(biāo)板孔底部,,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動混勻,
3. 溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘,。
4. 配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,甩干,,每孔加滿洗滌液,,靜置 30 秒后棄去,如此重復(fù) 5 次,,拍干,。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50%l,空白孔除外,。
7. 溫育:操作同 3,。
8. 洗滌:操作同 5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑 A50%l,,再加入顯色劑 B50%l,,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15 分鐘.
10. 終止:每孔加終止液 50%l,,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色),。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值),。 測定應(yīng)在加終止液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。
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