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人類白細胞抗原G(HLA-G)ELISA試劑盒樣本處理及要求

時間:2019/6/26閱讀:346
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人類白細胞抗原G(HLA-G)ELISA試劑盒樣本處理及要求

1.  血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘,,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,,但應避免反復凍融,。
2.  血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000g離心20分鐘,,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,,但應避免反復凍融。
3.  細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:1000g離心20分鐘,,取上清即可檢測,,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融,。
注:標本溶血會影響后檢測結(jié)果,,因此溶血標本不宜進行此項檢測。

操作步驟

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,,剩余板條用自封袋密封放回4℃,。

2.  設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL,;

3.  樣本孔中加入待測樣本50μL,;空白孔不加。

4.  除空白孔外,,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。

5.  棄去液體,,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),,靜置1min,,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板),。

6.  每孔加入底物A,、B各50μL,37℃避光孵育15min,。

7.  每孔加入終止液50μL,,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值,。

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