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豬ELISA試劑盒操作要素對ELISA試劑盒的影響ELISA試劑盒測定過程:固相包被→加待測樣品→溫育→洗刷+加酶標物→溫育→洗刷→加底物→溫育一加停止液→比色→斷定成果,。
ELISA試劑盒操作較冗雜,在操作中應留意以下4個方面,。
1. 在成批手藝檢測中,,還應留意操作時差的影響,。加樣及混勻時刻的差異,,使抗原抗體反響和酶促反響時刻不一致,,對競爭法及定量檢測影響很大,不留意可能會導致過錯成果或定量禁絕,。
2. 洗刷是ELISA試劑盒操作過程中決議試驗成敗的一個關鍵過程,。意圖是除掉未結合的免疫反響物,,停止抗原抗體反響,除掉標本中與反響無關的成分,、游離的酶標物以及反響過程中吸附于固相載體上的非特異性物質,。可用洗板機洗板或手藝洗板,,前者洗刷質量較好,,各反響孔洗刷作用均一,批內,、批間差異小,,手藝洗板應留意操控各孔洗刷作用,差異不宜太大,。
3. 加樣一般運用加液器,,在ELISA試劑盒中一般有4次加樣:加標本、加酶結合物,、加底物和加停止液,。加標本時有必要每份標本運用一支移液器吸嘴,避免穿插污染,。加酶結合物,、底物和停止液時則不需更換吸嘴。
4. 跟著病況的發(fā)展或由其他要素影響,,某些抗體在機體內的含量發(fā)作大幅動搖,,因此有必要對標本進行預處理。直接法測定中,,標本恰當稀釋還可下降非特異性反響,。
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