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ELISA試劑盒技術(shù)專員對解析出其實驗技術(shù)要點,，下面一起來看看吧。
1. 準備好所有實驗額外所需物品，如試管,、吸頭、移液器,、離心機等,；
2. 根據(jù)檢測標本數(shù)量確定所需試劑的量；
3. 按說明書將所用試劑平衡至室溫,，配制所需試劑,；
4. 標本制備要規(guī)范，每份標本體積要按2-3個復(fù)孔以上的量制備,，盡量分裝做備份,。短期內(nèi)無法實驗者，注意低溫保存,。
實驗中為了確定*佳信號和背景應(yīng)將捕獲抗體（0.5-4μg/ml）和檢測抗體（0.25-2μg/ml）在預(yù)實驗中進行彼此相抗的滴定,。同時，應(yīng)包括在適當(dāng)范圍內(nèi)的標準品的系列稀釋,。按試劑說明書常規(guī)提供的范圍進行操作,。
標準品的配制：對于每種細胞因子應(yīng)仔細閱讀說明書，注意每批的細節(jié),。在使用細胞因子前,，瞬時離心試劑瓶，盡可能多地收回其中的細胞因子,。根據(jù)每批說明書中的細節(jié),，將凍干的細胞因子復(fù)溶。
一般待測抗原標準曲線的線性范圍的可通過將標準品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml 到15pg/ml,?？衫脴藴实腅LISA操作流程、放大試劑盒,、第三類試劑,、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度,。
為了優(yōu)化靈敏度，建議過夜孵育標準品和標本,。若使用過氧化物酶作為顯色系統(tǒng),，應(yīng)嚴禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉，疊氮鈉可抑制過氧化物酶的活性,。當(dāng)測定混合液體中的抗原時,，如血清，建議在標本稀釋液中加不相干的Ig,。
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