ELISA試劑盒技術專員對解析出其實驗技術要點,下面一起來看看吧,。
1. 準備好所有實驗額外所需物品,,如試管、吸頭,、移液器,、離心機等,;
2. 根據檢測標本數量確定所需試劑的量;
3. 按說明書將所用試劑平衡至室溫,,配制所需試劑,;
4. 標本制備要規(guī)范,每份標本體積要按2-3個復孔以上的量制備,,盡量分裝做備份,。短期內無法實驗者,注意低溫保存,。
實驗中為了確定*佳信號和背景應將捕獲抗體(0.5-4μg/ml)和檢測抗體(0.25-2μg/ml)在預實驗中進行彼此相抗的滴定,。同時,應包括在適當范圍內的標準品的系列稀釋,。按試劑說明書常規(guī)提供的范圍進行操作,。
標準品的配制:對于每種細胞因子應仔細閱讀說明書,注意每批的細節(jié),。在使用細胞因子前,,瞬時離心試劑瓶,盡可能多地收回其中的細胞因子,。根據每批說明書中的細節(jié),,將凍干的細胞因子復溶。
一般待測抗原標準曲線的線性范圍的可通過將標準品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml 到15pg/ml,??衫脴藴实腅LISA操作流程、放大試劑盒,、第三類試劑,、或改變酶底物系統可在一定范圍內提高靈敏度。
為了優(yōu)化靈敏度,,建議過夜孵育標準品和標本,。若使用過氧化物酶作為顯色系統,應嚴禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,,疊氮鈉可抑制過氧化物酶的活性。當測定混合液體中的抗原時,,如血清,,建議在標本稀釋液中加不相干的Ig。
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