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酶聯(lián)免疫實驗簡稱ELISA試劑盒批發(fā)實驗,，實驗中顯色與比色十分重要,，今天上海研生就為大家講解一下有關顯色與比色的問題,！
TMB 經HRP 作用后，約40 分鐘顯色達,，隨即逐漸減弱,，至2 小時后即可*消退***色。TMB 的終止液有多種,，疊氮鈉和十二烷基硫酸鈉(SDS)等酶抑制劑均可使反應終止,。這類終止劑尚能使藍色維持較長時間(12-24 小時)不褪，是目視判斷的良好終止劑,。此外,，各類酸性終止液則會使藍色轉變成黃色，此時可用特定的波長(450nm)測讀吸光值,。酶標比色儀簡稱酶標儀,，通常指于測讀ELISA 結果吸光度的光度計。酶標儀的主要性能指標有：測讀速度,、讀數的準確性,、重復性、度和可測范圍,、線性等等,。優(yōu)良的酶標儀的讀數一般可到0.001，準確性為±1%,，重復性0.5%。酶標儀不應安置在陽光或強光照射下,，操作時室溫宜在15 -30℃ ,，使用前先預熱儀器 15-30 分鐘，測讀結果更穩(wěn)定,。
測讀A值時,，要選用產物的敏感吸收峰，如OPD用492nm 波長,。有的酶標儀可用雙波長式測讀,，即每孔先后測讀兩次，次在***適波長(W1)，第二次在不敏感波長(W2),，兩次測定間不移動ELISA板的位置,，終測得的A 值為兩者之差(W1-W2)。雙波長式測讀可減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾,。
肉眼判斷結果時,，顯色淺不易觀察，影響結果的準確性,，必須使用酶標儀檢測,，以保結果一致性。
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