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細胞株凍存技術

時間:2018/7/3閱讀:403
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細胞株實驗室低溫保存設備包括:液氮保存箱,、液氮罐,、-140℃/-150℃深冷低溫保存箱,、-86℃超低溫冰箱,、程控降溫儀、低溫冰箱(-20℃,、-30℃,、-40℃)、藥品保存箱,、疫苗保存箱,、血庫冰箱、層析柜,、防爆冰箱,、防火冰箱等。

檢驗冰箱可靠性和制冷能力的方法:1,、常規(guī)冰箱放置溫度計,;2、超低溫冰箱放置加熱器,、大量樣品或反復開門
很多化合物都可以作為凍存保護劑,,它們既可以單獨使用也可以聯(lián)合使用,例如糖,、血清和去污劑,。雖然凍存沒有準則,但是大家普遍認為二甲基亞砜(DMSO)和甘油是保護活細胞和組織使用zui廣泛且zui有效的凍存保護劑,。其他凍存保護劑可根據情況使用,,可單獨使用也可聯(lián)合使用,包括:聚乙烯乙二醇(polyethylene glycol),,丙烯乙二醇(propylene  glycol),,甘油(glycerine),聚乙烯吡咯烷酮(polyvinylpyrolidone),,山梨醇(sorbitol),,右旋糖苷(dextran),海藻糖(trehalose)。

凍存組織和整個器官的需求,,促進了凍存方法的發(fā)展,,新方法也提高了凍存細胞和有機體的復蘇。這些方法包括改變凍存保護劑的濃度和加入添加劑,,避免凍存過程引發(fā)的細胞調亡或 程序性死亡,。多年來人們一直認為,是凍存過程中產生的細胞內物理變化或損壞,,造成凍存后細胞的死亡,。而zui近有研究發(fā)現,一些更為精細的胞內活動可能導致了細胞死亡,,而這些活動可在一定程度上受控于適當的凍存添加劑,。

凍存過程中,凍存保護劑有多種功能,。例如,,DMSO 可以降低冰點,促進細胞在胞內冰晶形成之前脫水更加*,。普遍認為,,當凍存保護劑可有效穿透細胞,延遲胞內冰晶形成,,降低溶液效應時,,凍存保護的效果*。另外,,需要根據凍存的細胞類型來選擇凍存保護劑,。對絕大多數細胞來說,甘油是更好的選擇,,因為它的毒性比DMSO 小,。但是,DMSO 具有更好的滲透性,, 通常作為較大型較復雜的細胞凍存,,如原生生物。在添加到細胞株懸液之前,,凍存保護劑應該用新鮮培養(yǎng)基稀釋到適宜濃度,,這能zui小化潛在的化學反應損害,并確保細胞能均一接觸到保護劑,,減少毒害效應,。DMSO 和甘油通常使用的濃度范圍為 5-10%(v/ v)。除了用于植物細胞,,二者一般不聯(lián)合使用,。

 鋅指蛋白474IgG 大鼠橫紋肌輔肌動蛋白α (sm Actinin-α )

 鋅指脂蛋白-1aIgG 大鼠黑色素(MC Ab)

 鋅指脂蛋白-1bIgG 大鼠核因子κB抑制蛋白α(IKBα) 

 鋅指脂蛋白-1cIgG 大鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)

 鋅指脂蛋白217IgG 大鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)

 鋅指轉錄因子SlugIgG 大鼠核因子κB(NF-κB)

 新的飽食分子蛋白IgG 大鼠含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域酪氨酸激酶2(Tie-2)

 新朊蛋白/朊蛋白相關蛋白/沙杜(Shadoo)蛋白IgG 大鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)

 新型血管活性因子UCN(人)IgG 大鼠過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)
細胞株

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